1996 Fiscal Year Annual Research Report
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07559010
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| Section | 試験 |
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| Research Institution | Nara Institute of Science and Technology |
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Principal Investigator |
箱嶋 敏雄 奈良先端科学技術大学院大学, バイオサイエンス研究科, 教授 (00164773)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
東 常行 理学電機株式会社, 研究開発部, 研究員
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| Keywords | X線 / データ収集法 / 高輝度X線 / X線発生装置 / 回転対陰極 / 巨大複合体 / 構造生物学 |
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| Research Abstract |
蛋白質と核酸を含む巨大な構造体結晶を念頭に、超高輝度X線発生装置と点収束光学系、迅速な自動測定が可能な広い受光面をもつ回折計、及び試料低温装置からなる実験室X線強度データ収集系を構築した。
1)位置分解能と向上と測定限界分解能の拡大
集光光学系:焦点寸法は0.1mm(0.1mm×1.0mm)
カメラ半径と受光面の拡大:300mm×300mm
バックグラウンドの抑制:ヘリウムパス
2)X線の高出力と高輝度化
回転対陰極の大型化と高速回転:直径250mm、回転数9000rpm
3)結晶の安定化:試料低温技術:100K
このデータ収集系での1枚のIPの読みとり時間は3分となった。消去や移動等に約1分要す。リゾチーム結晶で行った種々の予備実験(結晶とIPフィルム間の距離は100mmとしてあり、このときの分解能の測定限界は、今回の測定システムでは1.66Å、従来型では2.0Åとなっている)では、従来のデータ系と比べてももっとも大きい差はR(merge)に現れた。今回のシステムが4.5%であるのに対して、従来型は7.7%となっている。従来型の露光時間を長く(2-3倍)して、両者の強度を同程度にして測定の完全性(completeness)を同一にしてもこのR(merge)の差はなくならなかった。今回の予備実験では1.5%-2%の差が残っている。巨大な構造体結晶は回折能が弱く、モザイク性も大きい。また、大格子になりやすく、回折の異方性も大きい。更に、結晶は非常に不安定で、些細な条件変化に対して、すぐにその回折能を失う。これらの結晶を用いた時の、今回構築したX線強度データ収集系の真価は来年度判断する。
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[Publications] A.Toumoto: "Preliminary X-ray studies on a new crystal form of PHO4-DNA complex." Acta Crystallogr.D53・1. 103-104 (1997)
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[Publications] T.Shimizu: "Crystal structure of PHO4-DNA complex." EMBO J.16(印刷中). (1997)
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[Publications] 箱嶋敏雄: "蛋白質/DNA複合体の構造研究" SR科学技術情報. 6・1. 3-8 (1996)
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[Publications] 箱嶋敏雄: "蛋白質による核酸塩基識別における特異的相互作用と非特異的相互作用" 研究成果報告集「薬学の進歩13」. 13. 73-84 (1997)
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[Publications] 箱嶋敏雄: "転写因子とその構造" 臨床医. 23・5(印刷中). (1997)
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[Publications] 箱嶋敏雄: "転写因子におけるDNA-蛋白質相互作用" 日本結晶学会誌,. (印刷中). (1997)
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[Publications] 箱嶋敏雄: "シリーズ・ニューバイオフィジックス3「構造生物学とその解析法」" 核酸及び核酸・蛋白質複合体(印刷中), (1997)
