1995 Fiscal Year Annual Research Report
オーキシンによるイネ科植物の伸長成長調節機構に関する研究
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07640864
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
桜井 直樹 広島大学, 総合科学部, 教授 (90136010)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川 直樹 広島大学, 総合科学部, 助手 (10263633)
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| Keywords | 細胞壁 / β-グルカナーゼ / オーキシン / 伸長生長 / 酵素精製 / タンパク質 / N末アミノ酸 / オオムギ |
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| Research Abstract |
本年度は、細胞壁に結合しているβ-グルカナーゼの内、β-1、3:1、4-グルカンをより強く分解するエキソ型グルカナーゼの精製を試みた。細胞壁から、3MのLiClでオオムギ芽生えからβ-グルカナーゼを抽出し、透析後遠心により沈殿を除き粗酵素標品とした。その後イオン交換カラム、ゲル濾過カラム、疎水性カラムを用い、酵素は50倍に精製された。SDS-PAGE上で一本のバンドを与えた。また、N末アミノ酸を30個読むことができた。この酵素の基質特異性を調べたところ、(1)PNP-β-グルコシドを切断する、(2)ラミナリビオースに対して最も活性が強い、(3)セロビオースに対する活性はラミナリビオースの1/2である、(4)1、3:1、4-β-グルカンをラミナリンの約1/2の速度で切る、(5)多糖類の基質としては、ラミナリンを最もよく切る、ということが分かった。以上の結果より、本酵素は、エキソ型のβ-グルカナーゼであると考えられる。この酵素のアミノ酸配列から、プローブを作成し、cDNAライブラリーからポジティブクローンを4個得ることができた。
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[Publications] 桜井直樹: "オーキシンの生合成とその調節" 植物の化学調節. 30. 121-125 (1995)
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[Publications] 桜井直樹: "サイトカイニンの生合成とその調節" 植物の化学調節. 30. 125-128 (1995)
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[Publications] 桜井直樹: "植物組織・細胞の力学物性" 日本バイオレオロジー学会誌. 9. 102-110 (1995)
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[Publications] 桜井直樹: "植物には血管があるか" 化学と生物. 34. 24-33 (1996)
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[Publications] Kojima, K. and N. Sakurai: "IAA distribution in etiolated spears of asparagus" Hort Science. 29. 822-822 (1995)
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[Publications] Yeo, U-D., W-Y. Soh, H. Tasaka, N. Sakurai, S. Kuraishi and K. Takeda: "Cell wall polysaccharides of callus and suspension-cultured cells from three cellulose-less mutants of barley (Hordeum vulgare L)" Plant Cell Physiology. 36. 931-936 (1995)
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[Publications] Nakagawa, N. and N. Sakurai: "Function of the proteins induced by cellulose synthesis inhibitor treatment" Plant Cell Physiol.36. S48-S48 (1995)
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[Publications] Kotake, T., Nakagawa, N. and N. Sakurai: "Purification and characterization of β-D-glucanase involved in cell elongation" Plant Cell Physiol.37. S125-S125 (1995)
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[Publications] Nakagawa, N. and N. Sakurai: "Identification of enes analogous to cellulose synthase of Acetobacter from plant EST databases." Plant Cell physiol.37. S127-S127 (1995)
