サイトカイニンにより抑制される遺伝子CR20の解析

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07640874
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Research Institution: Kobe Women's University
• Principal Investigator: 辻 英夫 神戸女子大学, 文学部, 教授 (20025323)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 竹葉 剛 京都府立大学, 生活科学部, 助教授 (10046500)
• Keywords: アラビドプシス / キュウリ / サイトカイニン / サイトカイニン抑制遺伝子 / ノンコーティングRNA

Research Abstract

本研究は,サイトカイニン作用の分子的な機構を知るために,初期に起こる遺伝子発現の変化に着目し,サイトカイニンによって迅速かつ特異的に抑制される遺伝子CR20の性質を明らかにしようとして行われた。CR20のcDNAに関しては,すでに得ている2個の他に,さらに4個を単離するとともに,ゲノミッククローンを2個単離し,これらを解析した結果,この遺伝子には三つのエクソンがあり,第2イントロンのスプライシングの違いにより少なくとも3種類の転写物が生じることがわかった。しかし,どの転写物にも,長いORFは認められなかった。また,タンパク質をコードする塩基配列かどうかを予測するコンピュータープログラム(TESTCODE)による解析を行った結果,これらの転写物がノンコーティングRNAであることが示唆された。キュウリCR20cDNAをプロープとして,アラビドプシスのcDNAライブラリーから,これと相同のAtCR20-1cDNAを得て,シークエンスしたところ,これも長いORFをもたず,TESTCODE解析の結果もノンコーティングRNAであることを示唆した。さらに,キュウリのCR20とアラビドプシスのAtCR20-1との間には,分岐したステム構造が可能な180ntから成る特徴的な配列が保存されていることが明らかになった。これらのことから,CR20やAtCR20-1は新しい機能をもつノンコーディングRNAである可能性が考えられる。現在,その機能を調べる手始めとして,キュウリCR20cDNAを導入したタバコ形質転換体を選抜している。

Research Products

• [Publications] Haruhiko Teramoto: "Changes in expression of two cytokinin-repressed genes, CR9 and CR20, in relation to aging, greening and wounding in cucumber" Planta. 196. 387-395 (1995)
• [Publications] Tomoko Toyama: "Cytokinin induces a rapid decrease in the levels of mRNAs for catalase, 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase, lectin and other unidentified proteins in etiolated cotyledons of cucumber" Plant and Cell Physiology. 36. 1349-1359 (1995)
• [Publications] Haruhiko Teramoto: "Isolation and characterization of cDNAs for cytokinin-repressed genes" Plant Growth Regulation. (In press). (1996)