微胞子虫リボソームの機能の解析による真核生物の起源に関する研究

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07640936
• Research Institution: The Nihon University
• Principal Investigator: 井上 正 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (90124213)
• Keywords: Nosema bombycis / ribosome / protein synthesis

Research Abstract

本研究は、原子真核生物の性状を留めていることが期待される微胞子虫類N.bombycisのリボソームの機能が、典型的な真核生物のそれと全く異ならないのか、あるいは原核生物のリボソームの性質と類似する点を有するのか、あるいはまた両者とは異なる第3の性質を有するのかを、試験管内タンパク質合成系を構築することにより明らかにして、真核生物の起源に関して考察を加えようとするものである。
N.bombycisのリボソームを用いる無細胞タンパク質合成系の構築を目指し、様々の細胞破壊法や細胞分画法を用いて、蛋白合成活性のある試験管内系を構築することを試みたが、高い活性を示す系の構築には成功しなかった。この原因としては、実験材料を休眠中の胞子から得ていることによることが考えられたので、人工的に発芽させた胞子を用いて同じことを試みたが、活性のある画分を得るには至っていない。
N.bombycisの無細胞抽出液には、蛋白質合成を阻害する因子が含まれている可能性があるので、E.coli,rat liverおよび家蚕より得た、活性のある無細胞蛋白質合成系にN.bombycisの可溶性画分を添加したところ、予想通り著しい阻害効果が観察された。一方、N.bombycis無細胞抽出液から得た可溶性画分には、アミノアシルtRNA合成活性は保持されていることが確認されたので、上記の阻害効果を呈する画分を同定し、それを除去することができれば、当初の目的に適う無細胞蛋白質合成系を確立することが可能であると思われる。

Research Products

• [Publications] Kawakami,Y.,Inoue,T.,Uchida,Y.,Hatakeyama,Y.,Iwano,H.,and Ishihara,R.: "Specific amplification of DNA from reference strains of Nosema bombycis (Nosematidae, Microsporidia)." J.Seric.Sci.Jpn.64. 165-172 (1995)