1995 Fiscal Year Annual Research Report
ATPの単離平滑筋細胞からの遊離に関与する細胞内シグナリング機構
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07670127
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
桂木 猛 福岡大学, 医学部, 教授 (40004717)
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| Keywords | 平滑筋初代培養細胞 / ATP遊離 / α,β-methylene ATP / bethanechol / angiotensin-II / AT_1-受容体遮断薬 / オ-タコイド |
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| Research Abstract |
本年度はモルモットの精管、結腸紐および回腸縦走筋平滑筋からそれぞれの初代培養細胞を作製することを試み、これに成功した。培養7〜10日目のdishより集めた10^5〜10^6個の培養細胞をミリポアフィルターに捕捉し、灌流実験を行ない、種々のアゴニストを投与し液中への遊離ATP量をluciferase法によって測定した。その結果培養精管平滑筋細胞からはhistamineによってATPの遊離が引き起こされるがこれはH_1-blockerであるpyrilamineの前投与によって拮抗された。また、回腸縦走筋細胞へのα,β-methylene ATPおよびbethanecholの投与により著しいATP遊離が引き起こされた。さらに興味ある事実として結腸紐細胞は他の平滑筋細胞とは異なり、angiotensin IIにより著しいATP遊離が見られ、これはAT_1-受容体遮断薬のlosartanおよびSC-52458により拮抗されAT_2-受容体遮断薬のPD-123319によって全く影響されなかった。これらの結果は従来の平滑筋切片標本での実験結果と完全に一致するため、切片標本からのアゴニスト誘発ATP遊離もまた非神経性に平滑筋細胞より遊離していることを強く支持するものである。これはATPがオ-タコイドとしての役割を担っていることを示唆していると考えられる。
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[Publications] Takeo Tokunaga: "ATP release evoked by isoprenaline from adrenergic nerves of guinea pig atrium" Neurosci. Lett.186. 95-98 (1995)
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[Publications] Takeshi Katsuragi: "Possible neuronal origin of ATP release evoked by forskolin and ouabain from guinea-pig atrial segments" Eur. J. Pharmacol.282. 213-217 (1995)
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[Publications] Sadaharu Usune: "Discrimination by nimodipine, but not by nifedipine, between phasic and tonic contraction of guinea pig taenia coli induced by K-depolarization" Can. J. Physiol. Pharmacol.(in press). (1996)
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[Publications] Sadaharu Usune: "Effects of PPADS and suramin on contractions and cytoplasmic Ca^<2+> changes evoked by AP_4A, ATP and α, β-methylene ATP in guinea-pig urinary bladder" Br. J. Pharmacol.(in press). (1996)
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[Publications] Takeshi Katsuragi: "Non-neuronal release of ATP and inositol 1, 4, 5-trisphosphate accumulation evoked by P_2-and M-receptor stimulation in guinea-pig ileal segments" J. Pharmacol. Exp. Ther.(in press). (1996)
