1995 Fiscal Year Annual Research Report
リポソームを用いる臓器特異的外来遺伝子発現システムの開発
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07670174
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
保田 立二 岡山大学, 医学部, 教授 (30092357)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡来 仁 岡山大学, 医学部, 講師 (50175139)
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| Keywords | 陽性荷電リポソーム / トランスフェクション / ルシフェラーゼ遺伝子 / 眼球 / 点眼 / 腎炎モデル / 転写因子 E2F / decoy DNA |
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| Research Abstract |
陽性荷電リポソーム脂質組成のトランスフェクション効率の比較検討を行った。Dilauroylphosphatidylcholine(DLPC)、dioleoylphosphatidylethanolamine(DOPE)とtrimethylammonioacetyldido-decyl-Dglutamate chloride(T MAG)のリポソーム、DOPEとdimethyloctadecylammonium bromide(DDAB)のリポソーム、DOPEとdimetylaminoethanecarbmoylcholesterol(DC-Chol)のリポソーム、DOPEとdioleyloxypropyltrimethylammonium chloride(DOTMA)のリポソームをin vitroの細胞培養系でルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとする系で調べた。その結果いずれの陽性荷電リポソームでも遺伝子導入は可能であったが、無血清培地ではDC-CholリポソームとDDABリポソームが効率がよかった。また血清存在下ではTMAGリポソーム(DOPE:DLPC:TMAGモル比1:1:0.8)で効率の高い、安定した遺伝子導入がみられた。
またこの組成のリポソームは点眼および眼球内への注入による遺伝子導入においても、効率のよいことが判明した。さらに腎臓疾患の遺伝子治療の試みとして、転写因子E2Fに対するdecoy DNAを合成し、TMAGリポソームで細胞内に導入する実験を行ったところ腎炎モデルで細胞増殖を抑制する効果があることが見いだされた。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Takai,T.,Yasuda T.and Ohmori H.: "5-Azacytidine Enhances transient expression of a transfected gene in cultured mammalian cells." Journal of Fermentation and Bioengineering. 79. 617-619 (1995)
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[Publications] 柏原直樹・前島洋平・守田吉孝・杉山斉・太田善介・保田立二等: "アンチセンスオリゴヌクレオチドによるメサンギウム細胞増殖抑制" 炎症. 15. 383-388 (1995)
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[Publications] 趙 丹丹、胡内修一、井内陽子、細谷恵子、稲垣純子、保田立二等: "陽性荷電リポソームによる遺伝子導入法の比較検討" 生化学. 67(No.7). 745-745 (1995)
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[Publications] Matsuo,T.,Masuda,I.,Yasuda,T.and Matsuo,N.: "Gene transfer to the retina of rat by liposome eye drops." Biochem.Biophys.Res.Commun.(印刷中). (1996)
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[Publications] Kashihara,N.,Maeshima,Y.,Ota,Z.,Yasuda,T.,et.al.: "Inhibition of mesangial cell proliferation and matrix expansion by antisense oligonucleotides. in “Molecular Nephrology"" KOHKO-DO,Niigata,Japan, 11 (1995)
