1996 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
07670234
|
|---|
| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
|---|
Principal Investigator |
北川 昌伸 東京医科歯科大学, 医学部, 講師 (10177834)
|
|---|
| Keywords | レトロウイルス / フレンド白血病ウイルス / Fv-4 / 遺伝子治療 |
|---|
| Research Abstract |
レトロウイルス感染に対する遺伝子治療モデルの確立を目的として実験を行った。フレンド白血病ウイルス(FLV)に対して抵抗性を示す宿主遺伝子であるFv-4^r遺伝子の、発現様式、作用機構、遺伝子治療への応用をふまえた予備実験の順で解析を加えた。
1)Fv-4^r遺伝子の発現様式の解析
a)Fv-4^r遺伝子産物の発現様式について免疫沈降法及びウェスタンブロット法によって解析したところ、この遺伝子産物は細胞から遊離蛋白として分泌されること、その結果として血清中に遺伝子産物が存在することがわかった。また、この遺伝子産物はレトロウイルス(ecotropic MuLV)のレセプターに特異的に結合する事も明らかとなった。
b)遺伝子産物の発現の臓器分布を調べると、造血系臓器及び一部の腺性臓器(膵、唾液腺)に発現していることがわかった。免疫電顕的に、遺伝子産物は細胞表面及びendoplasmic reticulumに認められた。
c)遺伝子産物の造血細胞系における発現細胞をFACS解析したところ、赤芽球系、顆粒球系、T細胞、B細胞系何れにも発現されており、その強度にはあまり差のないことがわかった。
2)Fv-4^r遺伝子の作用機構について
a)Fv-4^r遺伝子産物が細胞表面のウイルスレセプターに結合すると、レセプター干渉作用を介してその細胞への同種のウイルス(ecotropic MuLV)の結合が阻止されることがわかった。
3)遺伝子治療モデル作製への予備実験
a)マウスの白血病細胞株にFv-4^r遺伝子を導入し、発現させることが可能であった。
b)ウイルス感受性のマウスの骨髄細胞をとりだし、Fv-4^r遺伝子を導入した後、骨髄移植を行ったところ、血球系細胞には、ある程度のFv-4^r遺伝子産物の発現が認められることがわかった。
|
-
[Publications] Kitagawa M.et al.: "Distribution of Fv-4 resistant gene product in Friend leukemia virus-resistant Fv-4^r mouse strain" Experimental Hematology. 24. 1423-1431 (1996)
-
[Publications] Kitagawa M. et al.: "Establishment of a therapeutic model for retroviral infection using the genetic resistance mechanism of the host" Pathology International. 46. 719-725 (1996)
