1995 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト胎児制癌(EC)細胞の分化と細胞死の分子細胞学的機序

Research Project

Project/Area Number	07670258
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	秦順一慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051614)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山田健人慶應義塾大学, 医学部, 助手 (60230463) 梅澤明弘慶應義塾大学, 医学部, 講師 (70213486)
Keywords	ヒト胎児性癌細胞 / レチノール酸 / 栄養膜細胞 / HSP90 / in situ hybridization / EAT / mcl-1 / Bcl-2 / サブトラクション法
Research Abstract	われわれは,ヒト初期胚の分化成熟機構を明らかできる唯一の実験系である多分化能ヒト胎児性癌(EC)細胞(NCR-G3細胞,以下G3細胞)を独自に樹立し,同細胞を用いて分化形質発現の分子機序,分化初期係わる遺伝子の単離およびその機能をin vitro, in vivo実験計で明らかにした. G3細胞のレチノール酸(RA)による初期分化に関連する遺伝子の単離を試みた結果,HSP90, line-1および新たな遺伝子EATの3種の遺伝子を得た.G3細胞は42℃24時間の刺激で,多種の細胞系列に分化することが判明した.特に,栄養膜細胞系への分化が顕著に認められ,形態学的にも合胞体栄養細胞様巨細胞を呈した.同時に,その特異的産生物質であるhCGの産生能がRA添加時に匹敵する程度高いことがRNAおよび蛋白レベルで照明し得た.また,栄養膜細胞への分化に先立ってケラチン8分子がRNA,蛋白レベルで発現亢進していることが明らかとなった.新たな遺伝子EATは染色体上1q21にマップされ,Bc1-2ドメインを有しており,のちにmcl1と相同性が高いことが明らかとなった.また,その構造から細胞死関連遺伝子であることが示唆された.EAT遺伝子のヒト胎児での分布をin situ hybridizationで検索した結果,胎盤,中枢神経辺縁部,腎などで発現していることが明らかとなった.この結果はRNAレベルの発現と一致した.現在,ヒト胎児・成人組織での分布を詳細にしている.さらに,本遺伝子の個体レベルの機能を明らかにするためトランスジェニックニックマウスの作成を試み,2系統を樹立した.遺伝子導入が認められたマウスについて腫瘍発生,形成異常の有無について解析中である.以上の結果,体細胞の発生・分化と腫瘍化の接点に存在するヒトEC細胞の分化機構の分子的機序を明らかにすることができた.

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Nakano, Hata, J.: "A monoclonal antibody which specifically reacts with human embryonal carcinomas, spermatogonia and oocytes is able to induce human EC cell death." Differentiation. 58. 233-240 (1995)
[Publications] Kikuchi, H., Hata, J.: "A critical mutation in both alleles in not sufficient to cause Wilms' tumor." FEBS Letters. 360. 26-28 (1995)
[Publications] Shimada, K., Hata, J.: "Spatical and temporal regulation of the rat calmodulin gene III directed by a 877-base promoter and 103-base leader segment in the mature and embryonal central neruous system of transgenic mice." Molec Brain Res. 31. 61-70 (1995)
[Publications] Yamada, T., Hata, J.: "Detection of apoptotic cells with flowcytometry." Acta Histochem Cytochem. 28. 277-280 (1995)
[Publications] Yamada, T., Hata, J.: "Apoptosis of human embryonal carcinoma cells with in vitro differentiation" Cell Structareand Function. (in press).
[Publications] Maruyama, T., Hata, J.: "Heat shock induces differentiation of human embryonal cacinoma cell into trophoectodermal lineages, Exp." Cell Res.(in press).
[Publications] 秦順一ら編: "小児外科病理学" 文光堂, (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト胎児制癌(EC)細胞の分化と細胞死の分子細胞学的機序

Principal Investigator

秦 順一 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051614)

Research Products

[Publications] Nakano, Hata, J.: "A monoclonal antibody which specifically reacts with human embryonal carcinomas, spermatogonia and oocytes is able to induce human EC cell death." Differentiation. 58. 233-240 (1995)

[Publications] Kikuchi, H., Hata, J.: "A critical mutation in both alleles in not sufficient to cause Wilms' tumor." FEBS Letters. 360. 26-28 (1995)

[Publications] Shimada, K., Hata, J.: "Spatical and temporal regulation of the rat calmodulin gene III directed by a 877-base promoter and 103-base leader segment in the mature and embryonal central neruous system of transgenic mice." Molec Brain Res. 31. 61-70 (1995)

[Publications] Yamada, T., Hata, J.: "Detection of apoptotic cells with flowcytometry." Acta Histochem Cytochem. 28. 277-280 (1995)

[Publications] Yamada, T., Hata, J.: "Apoptosis of human embryonal carcinoma cells with in vitro differentiation" Cell Structareand Function. (in press).

[Publications] Maruyama, T., Hata, J.: "Heat shock induces differentiation of human embryonal cacinoma cell into trophoectodermal lineages, Exp." Cell Res.(in press).

[Publications] 秦 順一ら編: "小児外科病理学" 文光堂, (1995)

秦順一慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90051614)

[Publications] 秦順一ら編: "小児外科病理学" 文光堂, (1995)