マラリア原虫伝搬阻止単クローン抗体の標的蛋白の発現様式と伝搬阻止機構の解析

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07670279
• Research Institution: EHIME UNIVERSITY
• Principal Investigator: 鳥居 本美 愛媛大学, 医学部, 教授 (20164072)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坪井 敬文 愛媛大学, 医学部, 助手 (00188616)
• Keywords: マラリア / ハマダラ蚊 / オ-キネート / オーシスト / 単クローン抗体 / 伝搬阻止

Research Abstract

マラリア原虫の伝搬阻止に関与する標的蛋白のうち,融合体とオ-キネートの表面に特異的なものとしてPlasmodium falciparum,P.galinaceumでは分子量25kD,P.bergheiでは21kDの蛋白が報告されている。我々はネズミマラリア(P.yoelii)を用いて融合体・オートネートに対する単クローン抗体を作成し,分子量22kD(Pys22)または28kD(Pys28)の2種の蛋白を認識する複数の抗体を得た。間接蛍光抗体法および共焦点レーザー顕微鏡を用いてPys22とPys28の発現を観察した結果,これらの抗体の標的蛋白は融合体およびオ-キネートの虫体表面に存在することが明らかになった。ウエスタンブロティングと間接蛍光抗体法によって標的蛋白の発現を経時的に観測すると,Pys28は生殖母体の細胞質に反応が認められた。また,Pys28は吸血後1〜2時間で融合体およびオ-キネートの表面に発現し,Pys22は2〜4時間で融合体およびオ-キネートの虫体表面へ発現した。受動免疫したマウスと蚊の系を用いて単クローン抗体による伝搬阻止作用をみると,抗Pys28抗体,Pys22抗体ともに量反応関係が認められ,最終的には前者が100%、後者が95%のオーシスト形成阻害を示した。C5を欠損するDBA/2マウスと抗Pys28,抗Pys22単クローン抗体のF(ab')_2およびFab分画を用いた実験においてもオーシスト形成阻害が認められた。以上の結果から。単クローン抗体によるオーシスト形成阻害には補体系や抗体依存性細胞障害作用の関与なしに,抗体の結合のみで起きることを明らかにすることができた。