抗DNA抗体産生誘導蛋白質Nucleobindinの認識するDNA塩基配列の決定

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07670528
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 窪田 哲朗 東京医科歯科大学, 医学部, 助教授 (90205138)
• Keywords: ヌクレオバインディン(nucleobindin) / 抗DNA抗体 / DNA結合性蛋白質 / 自己免疫

Research Abstract

Nucleobindinの生理活性および性質に関して以下のような進展がみられた。
1.自己免疫疾患の遺伝的素因のない正常の動物であるBALB/cマウスに、組み換え(r)Nucを投与することにより、抗DNA抗体産生をはじめとする自己抗体の産生が誘導された。
2.全身性エリテマトーデスの動物モデルであるMRL/lpr、C3H/gld、雄BXSBなどのマウスのリンパ組織において、nucleobindin mRNAの発現の亢進していることが観察された。
3.ループスモデルマウスにおけるnucleobindinの産生亢進は、抗Nucペプチド抗体を用いた免疫組織化学的検討により、蛋白質のレベルでも確認できた。
4.ヒト悪性リンパ腫細胞株Molt4の核抽出液より、抗ヒトNucモノクローナル抗体を用いて、天然のnucleobindinを免疫沈降させることに成功した。
5.中央に26個のランダムな塩基配列を含むオリゴヌクレオチドを合成し、ヒトrNucとの結合性を検討し、親和性の強いものを選んでその塩基配列を調べた。その結果、Nucと結合しないヌクレオチドと比較して、有意に高頻度に認められるいくつかのモチーフがみつかった。たとえばその内の CCACCACAATA というモチーフや GTGTGGA というモチーフはIL-2遺伝子の上流域にも存在することが判明した。今後Nucが種々の遺伝子の発現調節にどのように関わっているのか、機能的な面の研究を進める必要がある。

Research Products

• [Publications] Kanai,Y.et al.: "Induction of autoantibodies in normal mice by injection of nucleobindin and natural occurrence of antibodies in autoimmune MRL/lpr/lpr mice" Immunology Letters. 45. 35-42 (1995)
• [Publications] Iizuka,H.et al.: "Enhanced expression of nucleobindin in lymphatic organs of lupus-prone mice" Lupus. (印刷中).