自己免疫疾患T細胞のインテグリン接着分子シグナル伝達異常に関する研究

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07670539
• Research Institution: Saitama Medical School
• Principal Investigator: 竹内 勤 埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (50179610)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森 茂久 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (10190993)
• Keywords: チロシンリン酸化 / インテグリン / シグナル伝達 / pp125FAK

Research Abstract

インテグリンを介したシグナル伝達に着目して、全身性エリテマトーデス(SLE),慢性関節リウマチ(RA)の末梢血および滑膜において解析を行った。活動期SLE末梢血Tには、β2インテグリンが強く発現され、さらに血管炎を合併した症例では、α4β1インテグリンの発現増強が伴っていた。β2,α4β1両者の発現が高まった血管炎合併SLEのシグナル伝達機構を調べたところ、チロシンキナーゼpp125FAKのチロシンリン酸化が亢進し、しかも蛋白レベルでの発現が増強していることが明らかとなった。
共焦点レーザ顕微鏡を用いた免疫相織染色法によって滑膜組織での接着分子、シグナル伝達分子の発現を検討した。RA滑膜においても、コントロールの変形性関節症に比べ、インテグリンおよびそのリガンドが強く発現されていた。さらに、これら分子の発現増強が見られる血管周囲から表層下にかけて、非常に強いpp125FAKの発現が確認された。抗チロシンリン酸化抗体との二重染色で、pp125FAKに強いチロシンリン酸化が起こっていることが明らかとなった。in vitroの実験系を用いてどの細胞群に、pp125FAKの発現が見られるか解析したところ、A型マクロファージ様滑膜細胞、およびB型繊維芽細胞に検出された。マクロファージ系細胞での発現は低いものと予想していたが、発現のレベルはA型細胞に数倍強いことが明らかとなった。この細胞を抗インテグリン抗体で架橋し刺激を加え、細胞ライゼ-トからpp125FAKを免疫沈降して、そのチロシンリン酸化、蛋白発現を検討した。この実験系によって、A型マクロファージ様滑膜細胞では、インテグリンからのシグナルによってpp125FAKのチロシンリン酸化が強く引き起こされ、蛋白発現を増強していることが確認された。

Research Products

• [Publications] Takeuchi T.,et al.: "Tyrosine phosphorylated proteins in synovial cells of RA" Int Rev Immunol. (in press).
• [Publications] Takeuchi T.,et al.: "Characterization of SM17 reacting on activated antiger" Tissue Antiger. 48(4). 356- (1996)
• [Publications] Koide J.,et al: "Spontaneous establishment of EBV-infected fibroblast from RA" J Virol. 71(3). 2478-81 (1997)
• [Publications] Takeuchi T.,et al: "Decreased CD45 PTPase activity in SLE" Clin Exp Immunol. (in press).
• [Publications] Tsubota T.,et al: "Biopsy of labial salivary glands in the diagnosis of SjS" J Rheum. 23. 76-82 (1996)
• [Publications] Takeuchi T.,et al: "Characterization of tyrosine phosphorylation in synovial cells of RA." Arth Rheum. 38. 214- (1995)
• [Publications] 竹内勤: "免疫疾患-state of arts" 今西二郎、淀井淳司、湊長博、山本一彦 編, 467 (1995)
• [Publications] 竹内勤: "図説病態内科講座" 高久史麿, 300 (1996)