1997 Fiscal Year Annual Research Report
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07670552
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| Research Institution | ASAHIKAWA MEDICAL COLLEGE |
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Principal Investigator |
小原 剛 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (60194627)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浦 等 旭川医科大学, 医学部, 助手 (70280865)
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| Keywords | 膵癌 / 化学療法 / 分子標的治療 / ras / アポトーシス |
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| Research Abstract |
farnesy化阻害剤であるFarnesylamine(FA)を新たに合成し,膵癌細胞とNIH3T3 fibroblastsのras-形質転換細胞(ras-cell)に対する抑制効果を昨年までに報告した.今回はFAと同様にfarnesy化阻害剤である(alpha-hydroxyfarnesyl)phosphonic acid(HFP)の膵癌細胞等に対する効果を検討し,合わせてraf-形質転換細胞(raf-cell)における効果も検討した.また,ヌードマウスにK-Rを移植後,FAを腹腔内投与し腫瘍増殖抑制効果を経時的に観察した.
(研究結果)
1)HFPは50μMの濃度で膵癌細胞(PK-1,-8,-9),ras-cellにアポトーシスを誘導した.アポトーシスはアガロース電気泳動によるDNAラダーの検出,細胞をヘキスト33258で染色し蛍光顕微鏡にて観察し,核の凝集,断片化を検出する事で確認した,しかし,HFP100μMの濃度でもNIH3T3にアポトーシスを認めなかった.
2)raf-cellではras-cellより高濃度(FA40μM,HFPでは100μM)でアポトーシスの誘導を観察した.
3)FAによるアポトーシスの誘導時にICE様プロテアーゼである32KDaのCaspase3が活性化され,17KDaの活性型を形成する事が抗Caspase3抗体を用いたWestern Blottingにて確認された.
4)50mg/Kg体重のFAはヌードマウス移植腫瘍に対し有意な増殖抑制効果を示した.
結論,farnesyltransferase阻害剤であるFAおよびHFPは活性型p21rasの脱farnesyl化によりRas-Raf-MAPKのシグナル伝達を抑制し,ICE様プロテアーゼの活性化を介し膵癌細胞およびK-ras形質転換細胞特異的にアポトーシスを誘導した.FAはヌードマウス移植腫瘍の増殖を抑制し,膵癌特異的癌化学療法の可能性が示された.
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Research Products
(5 results)
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[Publications] B.A.Ruggeri, et al: "Molecular pathology of primary and metastatic pancreatic lesions;Analysis of mutations and expression of the p53,mdm-2,and‥‥‥" Cancer. 79・4. 700-716 (1997)
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[Publications] 首藤龍人, 他: "膵癌におけるシスプラチンのアポトーシス誘導に及ぼすカフェインの効果" 膵臓. 21・4. 355-361 (1997)
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[Publications] 浦,等, 他: "膵癌細胞における蛋白farnesyl化によるアポトーシス誘導" 消化器癌の発生と進展. 9. 67-68 (1997)
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[Publications] Ura,H, et al: "Farnesylamine is selectively cytotoxic to pancreatic carcinoma cells and k-ras transformed fibroblast" Molecular Carcinogenesis. (in press). (1998)
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[Publications] Tanno,S, et al: "Proliferative potential and K-ras mutation in epithelial hyperplasia of the gallbladder in patients with anomalous pancreaticobiliary ductal…" Cancer. (in press). (1998)
