1996 Fiscal Year Annual Research Report

伊東細胞に発現する未知の蛋白の同定と伊東細胞活性化機構における役割に関する研究

Research Project

Project/Area Number	07670571
Research Institution	University of Tokyo
Principal Investigator	尾形逸郎東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80169169)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山岡美穂東京大学, 医学部・附属病院, 医員 (50261962) 新井雅裕東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (60271566) 池田均東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80202422)
Keywords	伊東細胞 / 星細胞 / 筋線維芽細胞 / 肝線維化 / CUBドメイン / RNA結合ドメイン
Research Abstract	伊東細胞は、肝線維化に際して活性化し、筋線維芽細胞様に形質を転換してコラゲンなどの細胞外マトリックスを多量に産生する。申請者らは、伊東細胞のライブラリーより二種類の未知の蛋白(C72,C81)に対応するcDNAをクローニングした。本研究は、これらの蛋白の機能と動態を解明することによって伊東細胞の活性化機構および肝線維化における役割を明らかにすることを目的とした。 (研究実績) 1.C72に関して、1404bpの読み取り枠(468アミノ酸残基)を含む1530bpの塩基配列を決定した。本cDNAはI型プロコラゲンC端プロティナーゼエンハンサーとしてクローニングされたcDNAと高いホモロジーを示した。予測アミノ酸配列から、本蛋白はN側に蛋白-蛋白相互作用に関与するとされるCUBドメインを2個、C側にRNA結合ドメインを1個有すると推定された。アンチセンスを用いた検討からは、蛋白合成を促進的に制御することが示唆された。予測アミノ酸配列のC端の合成ペプチドに対して作製した抗体は、伊東細胞の55kDaの蛋白を認識した。本蛋白は単離直後の伊東細胞では発現しておらず、培養により筋線維芽細胞様に形質が変化すると発現が増強した。C72mRNAは、正常肝では検出不能であったが、四塩化炭素投与による線維肝では発現が増強した。RNA結合能に関しては検討中である。 2.C81に関しては、1689塩基の読み取り枠(563アミノ酸残基)を含む2005塩基対を決定した。本蛋白は、既知の蛋白と有意なホモロジーが無く、その機能は未だ明らかでない。本蛋白の合成ペプチドによる特異抗体の作製は成功せず、リコンビナント蛋白による抗体作製を現在行なっている。C81mRNAは単離直後の伊東細胞に発現しており、培養すると発現が消失した。

Research Products
(4 results)

All Other

All Publications (4 results)

[Publications] 池田均他: "Cyclosporin A and FK-506 in inhibition of rat Ito cell activation in vitro." Hepatology. 22. 1161-1166 (1995)
[Publications] 松井淳他: "Inhibition of protein synthesis in liver stellate cells(LSC)by an antisense oligonucleotide from an RNA-binding protein of activated LSC." Hepatology. 22. 281A (1995)
[Publications] 池田均他: "Inhibitory effect of tranilast on activation and transforming growth factor B1 expression in cultured rat stellate cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.227. 322-327 (1996)
[Publications] 尾形逸郎他(分担): "Frontier in Hepatology '96" Axel Springer Japan Publishing Inc.(in press),

1996 Fiscal Year Annual Research Report

伊東細胞に発現する未知の蛋白の同定と伊東細胞活性化機構における役割に関する研究

Principal Investigator

尾形 逸郎 東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80169169)

Research Products

[Publications] 池田均 他: "Cyclosporin A and FK-506 in inhibition of rat Ito cell activation in vitro." Hepatology. 22. 1161-1166 (1995)

[Publications] 松井淳 他: "Inhibition of protein synthesis in liver stellate cells(LSC)by an antisense oligonucleotide from an RNA-binding protein of activated LSC." Hepatology. 22. 281A (1995)

[Publications] 池田均 他: "Inhibitory effect of tranilast on activation and transforming growth factor B1 expression in cultured rat stellate cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.227. 322-327 (1996)

[Publications] 尾形逸郎 他(分担): "Frontier in Hepatology '96" Axel Springer Japan Publishing Inc.(in press),

尾形逸郎東京大学, 医学部・附属病院, 助手 (80169169)

[Publications] 池田均他: "Cyclosporin A and FK-506 in inhibition of rat Ito cell activation in vitro." Hepatology. 22. 1161-1166 (1995)

[Publications] 松井淳他: "Inhibition of protein synthesis in liver stellate cells(LSC)by an antisense oligonucleotide from an RNA-binding protein of activated LSC." Hepatology. 22. 281A (1995)

[Publications] 池田均他: "Inhibitory effect of tranilast on activation and transforming growth factor B1 expression in cultured rat stellate cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.227. 322-327 (1996)

[Publications] 尾形逸郎他(分担): "Frontier in Hepatology '96" Axel Springer Japan Publishing Inc.(in press),