1996 Fiscal Year Annual Research Report
C型肝炎ウイルスの持続感染に果たすリンパ性樹状細胞の役割
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07670597
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| Research Institution | The Third Department of Internal Medicine, Ehime University School of Medicine |
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Principal Investigator |
恩地 森一 愛媛大学, 医学部, 教授 (10112260)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
舛本 俊一 愛媛大学, 医学部・附属病院, 助手 (40243779)
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| Keywords | HCV / リンパ性樹状細胞 / アデノウイルスベクター / allogenic MLR / I-A / H-2K |
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| Research Abstract |
HCVの持続感染にLDCの機能障害が関与しているか否かを明らかにする目的で、マウスリンパ性樹状細胞(LDC)にHCV遺伝子を発現させその障害の有無について検討した。
1,C57BL/6マウスの脾臓からSteinman-Inabaの方法によりLDCを単離し(純度80%以上)、これにLacZ遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターAdex1CALacZをmoi100以上で3時間反応させ、X-galで染色することによりその発現を確認したところ、マウスLDCの80%以上にLacZ遺伝子が導入された。
2,HCV遺伝子(コアーエンベロープ領域)を組み込んだアデノウイルスベクター(Adex1 CA327)を用いてLDCにHCV遺伝子を導入し、その発現を抗HCVコア蛋白を用いた免疫染色により確認したところLDCの80%以上にHCV遺伝子が導入された。
3,アデノウイルスベクターを用いてHCV遺伝子を導入したLDCと、ベクターのみのコントロールウイルス(Adex1w1)を反応させたLDCに、異系マウスより単離したTリンパ球を混合培養し(allogenic MLR)、Tリンパ球の[3H]-Thymidineの取り込みによるDNA合成量を測定し、各樹状細胞の抗原提示機能について検討した。その結果、HCD遺伝子を導入したLDCはAdex1w1と反応させたLDCに比し[3H]-Thymidineの取り込みは有意(p<0.05)に低下していた。また、各LDCにおけるI-A,H-2K,B7-2,ICAM-1の表出の程度をフローサイトメトリーにより比較検討したがこれらの抗原はいずれもその輝度に差を認めなかった。
以上よりHCV遺伝子をLDCで発現することにより樹状細胞機能が傷害されることが明らかとなり、HCVの持続感染にLDCの機能異常が関与していることが示唆された。今後その細胞障害機構について検討する予定である。
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[Publications] Akbar SMF: "Low responsiveness of hepatitis B virus-transgenic mice in antibody response to T-cell-dependent antigen : defect in antigen-presenting activity of dendritic cells" Immunology. 78. 468-475 (1993)
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[Publications] Akbar SMF: "Upregulation of MHC class II antigen on dendritic cells from hepatitis B virus transenic mice by interferon-γ : abrogation of immune response defect to a T-cell-dependent antigen" Immunology. 87. 519-527 (1996)
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[Publications] 舛本俊一: "原発性胆汁性肝硬変における樹状細胞の局在とMHC class II、costimulatory factorの発現に関する共焦点レーザー顕微鏡による検討" 肝臓. 37. 524-525 (1996)
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[Publications] Akbar SMF: "Placebo-controlled trial of vaccination with hepatitis B virus sueface antigen in hepatitis B virus transgenic mice" Journal of Hepatology. (in press). (1997)
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[Publications] 恩地森一: "樹状細胞と肝疾患" 肝臓. (印刷中). (1997)
