1995 Fiscal Year Annual Research Report
神経栄養因子BDNFのヒト脳での局在と神経変性疾患での病態に関する組織化学的研究
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07670712
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
中村 慎一 京都大学, 医学研究科, 助手 (20231475)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
秋口 一郎 京都大学, 医学研究科, 助教授 (30115779)
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| Keywords | BDNF / 免疫組織化学 / 神経栄養因子 / ラット脳 |
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| Research Abstract |
平成7年度は当初の予定どうりBDNFに対する特異的抗体の作製をおこない、抗力価の抗BDNF抗体を作製できた。抗血清は合成ペプチドをもちいたアフィニチ-クロマトグラフィにより精製した。いこの精製抗体について、以下の方法により、その特異性を検定した。この精製抗体はすくなくとも、6.3pMのBDNFを検出できることがドットブロット法で確認された。ラット脳をもちいたウェスタンブロット法により、ラット脳のホモジェネートで1.4kDのシングルバンドと反応し、ラット脳内のBDNFモノマーと特異的に反応することがあきらかとなった。また、この免疫反応性は抗原との前処理により完全に吸収された。
他のニューロトロフィンとの交叉反応性をみる目的で、リコンビナントのNGF、NT3、NT4/5との免疫反応性をウェスタンブロット法で検討したところ、全く交叉反応性は認められなかった。
以上の結果より、本抗体がラット脳内のBDNFと特異的に反応することが判明した。そこで、ラット脳で免疫組織化学法をもちいて、ラット脳内のBDNFの組織学的局在を検討した。その結果、BDNFが神経細胞とその突起に局在すること、さらに、従来の推測よりもより広汎に分布していることが明らかとなった。すなわち、大脳皮質、海馬、線条体、視床下部、視床の他、脳幹運動神経核、脊髄前角細胞などの神経細胞体に観察された。さらに、神経細胞終末と一部の通過線維にもみとめられ、軸索輸送により、輸送されていることも推測された。これらの知見について、専門誌に投稿中である。今後は、ヒト神経変性疾患、とくに最近関連を推測されている筋萎縮性側索硬化症を中心として、免疫組織化学的に検索する予定である。
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[Publications] 中村慎一: "Large neurons in the tuberomammillary nucleus in pstients with Parkinson′s disease and multple system atrophy" Neurology. (印刷中). (1996)
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[Publications] 中村慎一: "Toppgraphic distribution of monoamine oxidase-B neurons in mouse striatum" Neurosciencd Letters. 184. 29-31 (1995)
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[Publications] 中村慎一: "Monoamine oxidase-B psositive granular structures in the aged senescence accelerated mouse(SAMP8)" Acta Neuropathologica. 90. 626-632 (1995)
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[Publications] 大西克則: "Age-related decrease of nerve groth factor-like immunoreactivity in the basal forebrain of senescence-accelerated mice" Acta Neuropathologica. 90. 11-16 (1995)
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[Publications] 冨本秀和: "Ultrastructtural localization of amyloid protein precursor in the normal and postisehemic gerbil brain" Brain Research. 672. 187-195 (1995)
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[Publications] 冨本秀和: "Immunohistochemical study of apolipoprotein Ein human cerebrovascular white matter lesions" Acta Neuropathologica. 90. 608-614 (1995)
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[Publications] 中村慎一: "視床下部(神経科学の基礎と臨床IV)" ブレーン出版, 171 (1995)
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[Publications] 中村慎一: "Alzheimer′s and Parkinson′s Diseases-Recent Developments" Plenum Press, 724 (1995)
