1995 Fiscal Year Annual Research Report
リゾレシチンの動脈硬化症における遺伝子転写調節に与える影響とその代謝に関する研究
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07670793
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
久木山 清貴 熊本大学, 医学部, 講師 (00225129)
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| Keywords | 動脈硬化 / 血管内皮細胞 / 低比重リポ蛋白 / リゾレシチン |
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| Research Abstract |
【目的】Neutral Endopeptidase 24.11(NEP)は、Na利尿ペプチドを初めとする内因性の様々な生理活性・血管作動性ペプチドを分解することにより、血圧調節や体液、電解質調節に関与すると考えられており、最近血管壁内皮細胞におけるNEPの存在が明らかとなった。血管壁細胞に対する血管作動性ペプチドの作用は、血管内皮細胞におけるNEP発現と活性変化により調節され、高血圧・動脈硬化等の心血管疾患における血管壁再構築とその病態にNEPが関与している可能性がある。変性LDL・Lysophosphatidylcholine(LysoPC)は、粥状動脈硬化病変部位に豊富に存在しその病因・病態に深く関与しているとされている。今回我々は、動脈硬化血管内皮細胞におけるNEP発現・活性変化を検討する目的で、ヒト臍帯静脈血管内皮細胞におけるNEP発現・活性に対する変性LDL、LysoPCの効果を検討した。【方法】変性LDLは、ヒト血漿より超遠心法にて分離したLDLをCu2+とincubationして作製した。ヒト臍帯静脈から分離培養した血管内皮細胞(HUVEC)を変性LDL又はLysoPCと18時間incubation後に回収し、NEP活性については、HUVECの細胞膜分画を分離しgrutaryl-Ala-Ala-Phe-4MeO-2NAを用いた合成基質法にて、NEP発現についてはNEPのmRNAレベルをNorthern blot法にて、細胞膜表面のNEP抗原についてはNEP/CD10に対するモノクローナル抗体を用いてFlowcytometry(FACS)にて検討した。【結果】変性LDL(100mg protein/ml)とLysoPC(15mM)はHUVECにおけるNEP活性を有意に増加させ(NEP活性:nmol/min/mg protein;control:2.5±0.1,変性LDL:3.3±0.1^*,LysoPC:3.2±0.1^*,^*P<0.01vs control)、同時にNEPのmRNA発現、内皮細胞表面における発現ともに亢進させた。【総括】変性LDLとLysoPCは、ヒト血管内皮細胞においてNEPの発現と活性を増強した。粥状動脈硬化病変部位において変性LDL、LysoPCは、内皮細胞でのNEP発現、活性を増強し血管壁細胞に対する血管作動性ペプチドの作用に影響を与える可能性が示唆された。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Hitoshi Sumida,et al.: "Comparison of Secretion Pattern Between A-Type and B-Type Natriuretic Peptides in Patients With Old Myocardial Infarction" J.Am.Coll.Cardiol.25. 1105-1110 (1995)
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[Publications] Seigo Sugiyama,et al.: "Lipoproteins Regulate C-Type Natriuretic Peptide Secretion From Cultured Vascular Endothelial Cells" Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.15. 1968-1974 (1995)
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[Publications] Ken Okumura,et al: "Effects of Brain (B-Type) Natriuretic Peptide on Coronary Artery Diameter and Coronary Hemodynamic Variables in Humans" J.Am.Coll.Cardiol.25. 342-348 (1995)
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[Publications] Ken Okumura,et al.: "Diffuse Disorder of Coronary Artery Vasomotility in Patients With Coronary Spastic Angina : Hyperreactivity to the Constrictor Effects of Acetylcholine" J.Am.Coll.Cardiol.27. 45-52 (1996)
