糸球体内在細胞の遺伝子発現制御における転写因子NF κBの役割について

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07670834
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 柿崎 良樹 弘前大学, 医学部, 講師 (40160973)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 和賀 忍 弘前大学, 医学部, 助教授 (10167744)
• Keywords: 糸球体内皮細胞 / 糸球体メサンギウム細胞 / NF-κB / AP-1

Research Abstract

糸球体細胞における転写因子NF-κBの発現について以下の結果を得た.
1.培養糸球体内皮細胞におけるNF-κB活性について
細胞核蛋白を用いたゲルシフト法により検討したところ,NF-κBのDNA結合活性はTNF-αにより著名に増強した.NF-κBp65,p50に対する抗体を用いた検討から誘導されるNF-κBはこれらのダイマーであることが示された.これはprotein kinase C阻害剤では抑制されず,protein kinase A刺激剤,tyrosine kinase阻害剤によりともに抑制されたことから,活性化にはprotein kinase A,tyrosine kinaseの経路が関与すると考えられた.また,抗酸化剤による抑制を認め細胞内酸化還元反応による調節機序が示唆された.さらに,c-jun/AP-1阻害剤による抑制および核蛋白の抗Jun抗体処理による活性減少によりNF-κB活性化におけるAP-1の関与が推測された.AP-1活性の検討ではTNF-αによる活性増強を認め,これは抗Jun抗体のみならず抗NF-κB抗体の処理によっても減少することから,これら転写因子の結合とDNA結合活性における蛋白-蛋白相互作用が示唆された.
2.培養メサンギウム細胞におけるNF-κB活性について
TNF-αによるNF-κB活性の増強とtyrosine kinase阻害剤による抑制を認めNF-κB活性化におけるtyrosine kinaseの重要性が示されたが,抗酸化剤による抑制は認めず糸球体内皮細胞とは異なる結果であった.しかし,c-jun/AP-1阻害剤による抑制,さらに核蛋白の抗Jun抗体処理による活性減少を認め,AP-1との結合による相互のDNA結合活性の調節が糸球体内皮細胞とメサンギウム細胞の両者において示唆された.