1995 Fiscal Year Annual Research Report
CPTIIの脳内局在解析と脳型CPTII欠損症の遺伝子診断
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07670876
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
大谷 宜伸 熊本大学, 医学部, 助教授 (10168982)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
後藤 雄一 国立精神神経センター, 微細構造研究部, 室長 (20225668)
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| Keywords | CPTII欠損症 / 脳型CPTII / 遺伝子診断 / 脳障害 |
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| Research Abstract |
1 中枢神経系のCPTIIが肝由来と異なる脳型 isoformであるかの検討。
(1)肝CPTII抗体作成
ヒト肝から分離・精製した酵素CPTII(信州大学生化学教室、橋本隆教授から供与)をウサギに免疫後、CPTII抗体を作成した。
(2)肝CPTII抗体の免疫反応性の検討
免疫組織化学染色では、ヒト肝でペルオキシダーゼ法によってCPTIIが確認されたがヒト骨格筋、および中枢神経系組織(大脳・小脳)では確認できなかった。さらに抗体使用量を増やしimmunoblottingも用いて検討をすすめる。
2 脳型CPTII抗体の作成と脳内におけるCPTIIの分布・局在解析。
(1)脳型CPTIIの分離・精製
信州大学生化学教室、橋本隆教授に指導を受けながらMiyazawaらの方法(J.Biochem.94:529-542,1983)に準じて、まずラット脳組織を使って研究を開始したところである。ヒト剖検脳が得られ次第、平行してすすめる。
(2)脳内におけるCPTIIの分布・局在解析は(1)ができしだい実施する。
3 脳型CPTII欠損症における遺伝子異常の解析。
(1)遺伝子異常の解析
筋型の変異(Ser-113-Leu)は、脳型CPTII欠損症の2家系には存在しなかった。今後、Reye様症候群の症例でみられた変異(Arg-631-Cys)、(Val-368-Ile)の有無についても検討し、中枢神経障害を特徴とする遺伝子異常の発見につとめる。
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[Publications] Goto Y.: "Clinical features of MELAS and mitochondrial DNA mutations." Muscle Nerve Suppl. 3. 107-112 (1995)
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[Publications] Ozawa M.: "An 8_n344 mutation in mitochondrial DNA : A comparison between the proportion of mutant DNA and clinico-pathologic findings." Neuromusc.Disord.5. 483-488 (1995)
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[Publications] Nakamura M.: "A novel point mutation in the mitochondrial tRNA-Ser (UCN) gene detected in a family with MERRF/MELAS overlap syndrome." Biochem.Biophys.Res.Commun.24. 86-93 (1995)
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[Publications] Mizukami K.: "Progressive myoclonus epilepsy with unusual neuropathologic features." Neuropathology. 15. 127-132 (1995)
