特発性血小板減少性紫斑病における病態特異的リンパ球クロノタイプの検出

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07671210
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 小田 健司 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (90211143)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 兵頭 英出夫 広島大学, 医学部・附属病院, 助手 (30253074) ; 下村 壮司 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (20263741) ; 藤元 哲郎 広島大学, 保健管理センター, 助手 (00221549) ; 藤村 欣吾 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助教授 (80034114)
• Keywords: 特発性血小板減少性紫斑病 / T細胞クロノタイプ / SSCP解析

Research Abstract

特発性血小板減少性紫斑病(ITP)患者におけるT細胞異常を検出する目的で、患者末梢血単核球よりReverse transcriptase(RT)-polymerase chain reaction(PCR)によってT細胞受容体(TCR)β鎖complementarity determining region 3(CDR3)領域を増幅し、Single strand conformation polymorphism(SSCP)解析を行った。その結果、ITP患者ではT細胞のクローン性増殖を示す明瞭なバンドが健常人対照と比較して、複数のVβ遺伝子において有意に増加していた(ITP患者で平均15.5、標準偏差8.9、健常人で平均2.8、標準偏差2.6、p<0.01)。特に頻度の高い傾向があった遺伝子群はVβ3、6、10、13.1および14.1であった。これらのバンドがクローン性のT細胞由来であることを確認するために患者末梢血単核球をIL-2およびPHAによって非特異的に刺激した後、当該患者の脾摘によって得られた脾巣細胞やEBVトランスフォームB細胞株をfeederとして限界希釈によっていくつかのT細胞株を得、それらのクロノタイプを上記のSSCPによって解析し、患者末梢血単核球で得られた結果と比較した。患者K. O. より得られたT細胞株はいずれもCD4 single positive細胞であり、クロノタイプ解析した3つのT細胞株(Vβ6、13.1、14)のうち最初の2つは末梢血で見いだされたものと一致した。以上のことよりITP患者ではT細胞クローン集積が高頻度に認められ、自己免疫による血小板の破壊亢進機序への関連が示唆された。