1996 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子プロモーターおよび遺伝子組換えヘルペスウイルスによる特異的遺伝子治療の開発
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07671513
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
宮武 伸一 京都大学, 医学研究科, 講師 (90209916)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 潤 京都大学, 医学研究科, 助手 (80252435)
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| Keywords | 単純ヘルペスウイルス / 遺伝子治療 / アルブミン / 肝細胞癌 / 遺伝子プロモーター |
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| Research Abstract |
単純ヘルペスウイルス(Herpes Simplex Virus,HSV)を利用した悪性脳腫瘍に対する遺伝子治療の研究を行った。HSVの細胞障害活性は両刃の刃であるが、その細胞障害活性を何らかの方法で腫瘍細胞のみに向けられるようにコントロールできれば、replication competentなmutant HSVは理想的な遺伝子治療用ウイルスと考えられる。複製極初期に発現されるICP4はHSVの自己複製に重要であり、ICP4欠損HSVはこれ自体では遺伝子複製不能であり増殖できない。よって、ICP4遺伝子を腫瘍特異的な遺伝子プロモーターの下流に接続し、ICP4欠損変異型HSVに導入できれば、そのプロモーターが働く腫瘍細胞でのみウイルス遺伝子が複製され、その細胞を特異的に破壊することが期待される。われわれはhepatoma-specificなalbumin enhancer/promoter(e/p)を利用し、ICP4欠損変異型HSVにalbumin e/pによりICP4遺伝子をdriveする組換えウイルスG92Aを作成し、その分子ウイルス学的特性の解析を行った。G92AはSouthern Blot Analysisにて、狙い通りの遺伝子構築を確認しえた。また、G92Aはalbumin産生肝細胞癌に対しては、非albumin産生腫瘍細胞株に比べ、1000倍以上のプラーク形成能を認めた。また、in vitroにおいて、G92Aは肝細胞癌株においてはreplicationを示したが、非肝細胞癌においてはほとんどreplicationを示さなかった。in vivoにおいてもG92Aはヌードマウスに作成した肝細胞癌株Hep3B腫瘍塊中では活発にreplicationを示したが、前立腺癌株PC3、子宮頚部癌株HeLa中ではreplicationを示さなかった。一方対照として用いた。組織特異性を示さない組換えHSV(hrR3)は全ての腫瘍塊中でreplicationを示した。また、ヌードマウスに作成したHep3B腫瘍塊にG92Aを投与すると、著名な腫瘍退縮効果を認めた。
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[Publications] Shin-Ichi Miyatake,et al.: "Defective Herpes Simplec Virus Vectors Expressing Thymidine Kinase for the Treatment of Malignant Gliomn" in press in Cancer Gene Therapy.
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[Publications] Samuol D.Rebka,Shin-Ichi Miyatake,et al.: "Gene Therepy : Targeting Tumor Cell for Destinofin" in press in Human Cell.
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[Publications] 河野勝彦,宮武伸一,他: "脳下垂体腺腫の再手術の検討" ホルモンと臨床. 44. 92-95 (1996)
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[Publications] Nozomu Murai,Jun A.Takahashi,et al.: "Apoptoms of human gliom cells in vitro and in viro indeeced by a neutralious antibody against human basic fibrollist growth factor" Journal of Hourosargery. 85. 1072-1077 (1996)
