卵巣機能発現におけるIGF-IおよびIGF結合蛋白の役割の研究

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07671827
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 安達 知子 東京女子医科大学, 医学部(産婦人科), 助教授 (70175173)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 原 誠 東京女子医科大学, 医学部(産婦人科), 助手 (70246601) ; 岩下 光利 東京女子医科大学, 医学部(母子総合医療センター), 助教授 (30124936)
• Keywords: 卵巣顆粒膜細胞 / FSH / IGF-I / IGF結合蛋白 / プロテアーゼ

Research Abstract

生殖におけるヒト卵巣機能とIGF-Iおよびその結合蛋白(IGFBP)の解析を中心に行った。
1.顆粒膜細胞のエストラジオール(E2)分泌作用に及ぼすFSH、IGF-IおよびIGFBPの役割
体外受精の採卵時に卵胞より顆粒膜細胞を採取し培養後、IGF-IをIGFBPの存在下に添加し、E2分泌に及ぼす影響を解析した。同様の実験をFSH存在下に行った。
IGF-Iは濃度依存性にE2分泌を促進し、IGFBP-1と-3は濃度依存性に、IGF-Iによって促進されたE2分泌を抑制した。FSHはIGF-Iと相乗的にE2分泌を促進した。また、IGFBP-1と-3はFSHによるE2分泌促進には影響を与えなかった。
2.卵巣におけるIGF-Iのレセプターアッセイ
IGFBP-1および-3は濃度依存性にIGF-Iが顆粒膜細胞の膜分画に結合するのを抑制した。 IGFBP-1および-3は、IGF-Iがレセプターへ結合するのを抑制することにより、IGF-Iの作用発現を抑制することが明らかとなった。
3.FSHによるIGFBPを介する顆粒膜細胞の機能調節
顆粒膜細胞にFSHを添加して、培養液中のに分泌されるIGFBP-Iおよび-3の濃度をイッムノアッセイおよびWestern ligant blot(WLB)で評価した。
FSHはIGFBP-1の分泌を抑制し、WLBで評価したIGFBP-3の結合活性を抑制したが、immunoreactive-IGFBP-3の分泌を促進した。この免疫活性と結合活性の差を明らかにすべく、IGFBP-3のプロテアーゼ活性を分析するため、^<125>I-IGFBP-3とFSHで処理した培養液をインキュベートしたところ、IGFBP-3は分子量の小さいfragmentに分解された。以上より、FSHはヒト顆粒膜細胞に対するIGF-Iの作用を増強することにより卵胞発育、E2分泌を促進すると考えられる。その機序として、IGF-Iの作用を抑制する顆粒膜細胞からのIGFBP-I分泌およびプロテアーゼ活性を介したIGFBP-3の生物活性を抑制することによることが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] 安達知子ほか: "ヒト卵巣顆粒膜細胞におけるFSHとIGF-IおよびIGF結合蛋白の相互調節" 日本受精着床学会雑誌. 12. 125-127 (1995)
• [Publications] Tomoko Adachi, et al: "Regulation of IGF binding proteins by FSH in human luteinizing granulosa cells" Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 12. 639-643 (1995)
• [Publications] 安達知子ほか: "ヒト顆粒膜細胞におけるFSHの作用機序-IGF結合蛋白の分泌調節を介する機構の研究" 日本産科婦人科学会雑誌. 47. S481 (1995)
• [Publications] 安達知子ほか: "ヒト顆粒膜細胞のエストロゲンおよびIGF結合蛋白分泌に対するFSHとIGF-Iの作用の研究" 日本内分泌学会雑誌. 71. 427 (1995)