生体内腫瘍浸潤リンパ球,末梢血のT細胞クロナリティーと腫瘍特異的クロノタイプの解析

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07671832
• Research Institution: St.Marianna University, School of Medicine
• Principal Investigator: 林 和彦 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教授 (40164933)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 与那嶺 京子 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (20210784) ; 飯田 智博 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (60247377)
• Keywords: 腫瘍浸潤リンパ球 / T cell receptor / RT-PCR-SSCP法 / 悪性腫瘍

Research Abstract

ヒトの固形癌には、腫瘍浸潤リンパ球(tumor-infiltrating lymphocyte ; TIL)が存在し、これらのリンパ球が宿主の抗腫瘍反応を代表していると考えられている。T細胞の抗原の認識はT cell receptor(TCR)を介して行われ、TCRの再構成機構によってさまざまな抗原を認識することが分かっている。われわれは生体内でのT細胞のクロナリティーを明らかにするため、手術時に採取された固形癌(卵巣癌、子宮体癌)、所属リンパ節(LNL)、PBLのTCRVβ鎖についてRT-PCR-SSCP法でTCRクロナリティーの検討を行い、癌局所および転移リンパ節においてはT細胞を介した特異的な免疫反応がおきているが、同一患者でも癌の転移の無い部分では特異的免疫反応が起きていないことを明らかにした。また、試験管内で腫瘍に対して誘導された腫瘍特異的T細胞クローンと同一のクロノタイプのT細胞が原腫瘍のTILに存在するかをRT-PCR-SSCP法で検討する目的で、腫瘍とTILを共培養した。培養1週間後の結果は、原腫瘍のTILの解析結果よりもクローン集積が増強された。さらに、培養3〜4週間後にはTILのクロナリティーは原腫瘍のものよりクローナルに集積しているT細胞のうち一部は抗原刺激により維持され、その他の集積クローンは消失し、特定のクローンが増強することが認められた。そのクローンについて共通クローンの存在を確認し、DNAシークェンス分析をすすめているところである。
また、PBLや腹水中リンパ球(PEL)には自己腫瘍に反応しうるT細胞クローンが増強されていくと考えられているが、われわれは現在、継代培養に成功した培養悪性細胞を用いて同一患者のPBLまたはPELを刺激し、集積されると想定されるクローンについて検討中である。これらのクローンを同定し、制御できれば効果的な癌特異的免疫療法が可能となる。

Research Products

• [Publications] 林和彦: "Accumulation of drstict T cell clonotypes in human solid tumor" The Journal of Immunology. 154. 1804-1809 (1995)
• [Publications] 林和彦: "習慣流産の免疫療法" 産婦人科治療. 72・6. 948-956 (1996)
• [Publications] 林和彦: "Time course analysis of α^+β^+ T cell clones during normal pregnancy" European Journal of Immunology. 26. 834-838 (1996)