ミューラー細胞に存在する神経伝達物質受容体の同定とその機能の検討

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07671933
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 若倉 雅登 北里大学, 医学部, 助教授 (50137931)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山本 昇 北里大学, 看護学部, 教授 (10050543) ; 川崎 いづみ 北里大学, 医学部, 助手
• Keywords: 網膜ニューロン / ミューラー細胞 / 細胞内カルシウム濃度 / グルタミン酸受容体 / アセチルコリン受容体 / 神経伝達物質

Research Abstract

家兎網膜から非髄鞘部を小片化して浮遊培養とし、1週間後にこれを再度新鮮培養液中のカバーガラス上に培養仕直すことにより、ニューロンの殆ど混入しないミューラー細胞の培養が得られた。網膜ニューロンの培養はミューラー細胞上に生後1-2日の幼若ラット網膜をトリブシン処理したものを蒔くことにより、得られた。細胞内カルシウム濃度画像解析装置とカルシウム指示薬(Fura-2AM)を用いて、ミューラー細胞または網膜ニューロンに受容体アゴニストをアンタゴニストの存在、非存在下で作用させることによる、細胞内カルシウム濃度を調べた。まずゲルタミン酸受容体のうちAMPA/KA型受容体がミューラー細胞に存在する可能性を過去に指摘したが、その受容体の役割を知るためニューロンとミューラー細胞のアゴニストに対する応答性の違いを調べた。ミューラー細胞はニューロンに比べ10-100倍高濃度のアゴニストで応答がみられたが、培養内を予め高濃度のカイニン酸に暴露しておくと、ミューラー細胞の受容体アゴニストに対する応答が、低濃度化しかつ応答細胞の頻度も多くなることがわかった。この結果は論文にまとめられた。アセチルコリン受容体についても同様の方法で調べてきたが、ニューロンではニコチン、ムスカリンいずれの型の受容体アゴニストにも応答がみられるが、ミューラー細胞ではムスカリン受容体アゴニストのみから応答が得られた。ムスカリン受容体の薬理学的サブタイプを調べる実験からは、両細胞ともM1が優位と考えられた。

Research Products

• [Publications] 庄子沼代,若倉雅登 他: "Luminol-enhanced chemiluminesccnce in retinal neurons folloning anticlulinesterase pesticide administration" Investigative Ophttralbiology Visual Science. 37・3. S628- (1996)
• [Publications] 劉瑶,若倉雅登: "The adenosine/purinergic receptor in cultured Muller cells" Investigative Oplelhalmology Visual Scieuce. 37・3. S1041- (1996)
• [Publications] 若倉雅登 川崎いづみ: "Acetylcholine receptors in culturel retinal neurons and Miilor cells" Inaitigative Optrttabnology Visnal Sci. 37・3. S1042- (1996)
• [Publications] 川崎いづみ,若倉雅登: "Possible roles of AMPA/KA receptor in cuttured Miiller cells" Jpn J Ophttralmology. 30・2. 158-166 (1996)
• [Publications] 田野保雄,木下茂,若倉雅登: "眼組織の移植" メディカルビュー社, 214 (1996)