1995 Fiscal Year Annual Research Report
口腔マイコプラズマによるTならびにBリンパ球の活性化
| Project/Area Number |
07672035
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
|
| Research Institution | Hokkaido University |
|---|
Principal Investigator |
柴田 健一郎 北海道大学, 歯学部, 助手 (50145265)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡邊 継男 北海道大学, 歯学部, 教授 (10064362)
|
|---|
| Keywords | 口腔マイコプラズマ / Tリンパ球 / コンカナバリンA / アポトーシス / TNFα |
|---|
| Research Abstract |
我々は、Mycoplasma fermentans(Mf)ならびにM.salivarium(Ms)の細胞膜がコンカナバリンA(Con A)によるT細胞の活性化を阻害することを明かにした。本研究では、そのメカニズムを明かにすることを目的とした。
Mf IID 812ならびにMs ATCC23064細胞を超音波処理することにより細胞膜画分を調製した。6-9週令の雄のddyマウスの脾臓細胞をナイロンウ-ルカラムにかけ、その素通した細胞をマウス脾臓T細胞(Tms)とした。5x10^5個のTmsをCon A添加RPMI1640培地(10%FBS含有)0.2mlで48時間培養した後、0.05μCiの^3H-thymidine(TT)でパルスした。さらに、18時間培養した後、細胞に取り込まれた放射能を液体シンチレーションカウンターで定量した。
Con AによるTmsの活性化のCon A濃度依存性を詳細に調べたところ、TT取り込み活性(TT活性)は、5x10^5個のTmsに対して約1.0μgのCon A刺激で最大に達し、それ以上の濃度では急激に減少した。Tmsの死細胞の増加並びに染色体DNAの断片化により、この急激な減少はTmsのアポトーシスによることがわかった。さらに、この系にMsあるいはMf細胞膜を共存させると、Tmsのアポトーシスが加速されることがわかった。以上のことから、Con AによるT細胞の活性化は両マイコプラズマ(M)細胞膜により阻害されたのではなく、Con Aによって誘導されたTmsのアポトーシスが両M細胞膜によって加速されたものであることがわかった。両M細胞膜の有する本活性(アポトーシス促進活性)はTMFα抗体で有意に阻害された。さらに、TmsをM細胞膜で刺激することにより、TNFαが産生されることがELISA法で確認された。したがって、両M細胞膜の有するアポトーシス促進活性には、M細胞膜刺激によりTmsから産生されたTNFαが重要な役割を果たしているものと推測された。
|
