1996 Fiscal Year Annual Research Report
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07672105
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
浜崎 辰夫 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (70228534)
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| Keywords | マウス / 培養骨芽細胞 / 荷重負荷 / 荷重分散 / 細胞周期 / 遺伝子発現 / 細胞増殖 |
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| Research Abstract |
前年度、荷重分散(クリノスタット回転[模擬微小重力])培養により培養骨芽細胞の細胞増殖率が抑制され、その抑制はG_1期からS期への移行およびS期の進行速度が低下することを示した。また、上皮成長因子(EGF)処理によってあらかじめc-fos遺伝子発現量を高めておいたマウスMC3T3-E1細胞は、荷重分散培養下では発現量が低下することが明らかとなった。
本年度は、培養骨芽細胞に荷重を加えた時、すなわち荷重負荷させたときの細胞増殖率、細胞周期および増殖関連遺伝子発現に及ぼす影響を、遠心培養によって解析した。その結果、マウスMC3T3-E1細胞を48時間、30Gの遠心力下で培養すると、静置対照細胞と比較して約13%、また60Gでは約26%の増殖促進が認められた。そこでDNA合成阻害剤であるaphidicolinで細胞を処理してG_1/S期で同調させた。その後、再び細胞周期を進行させて荷重負荷条件で細胞周期の経時的変化をフローサイトメトリーを用いて調べた。その結果、荷重負荷は培養細胞のS期の進行を促進していることがわかった。また、荷重負荷によって細胞増殖関連遺伝子群の発現量が増加されることがわかった。通常の場合、増殖関連遺伝子の発現量は相対的に低いため、解析はRT-PCRで行った。その結果、c-fos遺伝子は荷重負荷開始10分前に、またc-myc遺伝子は30分後に一過的にその発現量が増加することがわかった。一方、c-junやp53遺伝子発現量は一定であり、対照遺伝子として用いたG3PDHと変わらなかった。
荷重変化によって、培養骨芽細胞の増殖率や細胞分裂周期、また増殖関連遺伝子の発現が変化が認められることは興味深い。荷重または重力感受性の細胞レベルでの機構を、さらに詳細に解析して行きたいと考えている。
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[Publications] Yamagami,Murata,Hamazaki,and Iuchi: "Intrahepatic Formation of SF Substances,the Precursors of Egg Envelope Proteins,in Response to Estrogen Administration in Fish." Perspectives Comparative Endocrinology. 94. 316-324 (1994)
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[Publications] Duke,Sato,Hamazaki,and Montufar-solis: "Clinorotation Inhibits Chondrogenesis in Micromass Cultures of Embryonic Mouse Limb Cells." Environmental Medicine. 39. 1-12 (1995)
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[Publications] 浜崎辰夫・佐藤温重: "骨芽細胞の増殖関連遺伝子発現に及ぼす荷重の影響" 口腔病学会雑誌. 63. 524- (1996)
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[Publications] 新井、増田、浜崎、佐藤、佐藤: "システムダイナミクスモデルを応用した細胞周期の動的解析." 歯科材料・器械. 15. 459-466 (1996)
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[Publications] 佐藤、浜崎、増田、本郷、佐藤: "微小重力下での培養へのアプローチ" 組織培養. 22. 381-384 (1996)
