1995 Fiscal Year Annual Research Report

薬物代謝酵素の遺伝子多型の解析

Research Project

Project/Area Number	07672337
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	横井毅北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鎌滝哲也北海道大学, 薬学部, 教授 (00009177) 中山佳都夫北海道大学, 薬学部, 教務職員 (20261323) 佐久間勉北海道大学, 薬学部, 助手 (30250468)
Keywords	CYP2D6 / polymorphism / poor metabolizer / CYP1A2 / population study / CYP2A6 / 遺伝子診断
Research Abstract	(1)申請者が発見した、CYP2D6(デブリソキン/スパルテイン代謝型P450)のエクソン9における9塩基挿入の変異について、この変異が代謝活性におよぼす影響に関して、酵母発現系を用いて検討し、その結果、この変異により代謝活性のほとんどを失うことを明らかにした。さらにPCR反応(polymerase chain reaction)によって、9塩基挿入の遺伝子変異の頻度についてpopulation studyを行なった。さらに同時に、これまでに報告されているA型変異(エクソン5における一塩基欠損)、B型変異(エクソン4における一塩基置換)とD型変異(CYP2D6全体の欠損)についても、健常人約400名について検討した。その結果D型変異と9塩基挿入型変異が多いことを明らかにし、この遺伝子診断で日本人の約0.2%がPMと判定された。現在、前記の変異で説明が出来ない一名のPMについて、詳しく検討中である。 (2)CYP2A6(クマリン代謝型P450)活性に個体差が存在することは示唆されているものの、詳しい研究は全くなされていなかった。申請者らはCYP2A6の特異的基質となる薬物を見い出し、その代謝反応について詳しく検討した。その結果、本薬の代謝反応には、もっぱらCYP2A6が関与し、僅かながらCYP2Bの関与も認められものの、これまでに報告のない新しいCYP2A6特異的基質(試験薬)であることを明らかにした。さらに制限酵素断片長測定にてPM特異的と思われるバンドを見いだした。現在この部位のゲノム遺伝子を解析中である。 (3)CYP1A2(カフェイン/フェナセチン代謝型P450)については、CYP1A2遺伝子上流の-2,964番の塩基変異をPCR法で判定した。その結果、カフェインのin vivo代謝能で得られたデータに対して、弱いながらも相関を認めた。

Research Products

(9 results)

All Other

All Publications (9 results)

[Publications] Keiichi Nunoya et al.: "(+)-Cis-3,5-dimethyl-2-(3-pyridyl)thazolidin-4-one hydrochloride(SM-12502)as a novel substrate for cytochrome P450 2A6(CYP2a6)in human liver microsomes." J.Pharma.Exp.Ther.(in press).
[Publications] Miyuki Shimoji et al.: "Establishment of immortal hepatocytes from a CYP3A7-transgenic/p53-knockout mouse." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press).
[Publications] Hisashi Hashimoto et al.: "Fetus-specific CYP3A7 and adult-specific CYP3A4 expressed in Chinese hamster CHL cells have similar capacity to activate carcinogenic mycotoxins." Cancer Res.55. 787-791 (1995)
[Publications] Tsuyoshi Yokoi et al.: "Occurrence of autoimmune antibodies to liver microsomal protein as the cause of lethal hepatitis in LEC rats:effects of TJN-101 on the development of hepatitis and the autoantibodies" Toxicology Letters,. 76. 33-38 (1995)
[Publications] Tsutomu Sakuma et al.,: "Efficient complementary DNA directed expression of human fetal liver cytochrome P450(CYP3A7)in insect cells using baculovirus." Biochem.Mol.Biol.Intem.35. 447-455 (1995)
[Publications] Tsutomu Sakuma et al.: "Isolation and characterization of a new cDNA clone belonging to the cytochrome P450 2C gene subfamily in hamsters." Arch.Biochem.Biophys.319. 267-273 (1995)
[Publications] Ken-ichi Nunoya et al.: "S-oxidation of (+)-cis-3,5-dimethyl-2-(3-pyridyl)thazolidin-4-one hydrochloride by hepatic rat flavin-containing monooxygenase 1 expressed in yeast." Xenobiotica. 25. 1283-1291 (1995)
[Publications] Tsuyoshi Yokoi et al.: "Inhibition of UDP-glucuronsyltransferase by aglycons of natural blucuronides in Kampo medicines using SN-38(7-ethyl-10-hydroxycamptothecin)as a substrate." Japn.J.Cancer Res.86. 985-989 (1995)
[Publications] Tsutomu Sakuma et al.: "Hormonal regulation of the mRNA level of male dominant cytochrome P450 (CYP2C27)in hamster livers." Pharmacol.Res.31. 371-374 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

薬物代謝酵素の遺伝子多型の解析

Principal Investigator

横井 毅 北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)

Research Products

[Publications] Keiichi Nunoya et al.: "(+)-Cis-3,5-dimethyl-2-(3-pyridyl)thazolidin-4-one hydrochloride(SM-12502)as a novel substrate for cytochrome P450 2A6(CYP2a6)in human liver microsomes." J.Pharma.Exp.Ther.(in press).

[Publications] Miyuki Shimoji et al.: "Establishment of immortal hepatocytes from a CYP3A7-transgenic/p53-knockout mouse." Biochem.Biophys.Res.Commun.(in press).

[Publications] Hisashi Hashimoto et al.: "Fetus-specific CYP3A7 and adult-specific CYP3A4 expressed in Chinese hamster CHL cells have similar capacity to activate carcinogenic mycotoxins." Cancer Res.55. 787-791 (1995)

[Publications] Tsuyoshi Yokoi et al.: "Occurrence of autoimmune antibodies to liver microsomal protein as the cause of lethal hepatitis in LEC rats:effects of TJN-101 on the development of hepatitis and the autoantibodies" Toxicology Letters,. 76. 33-38 (1995)

[Publications] Tsutomu Sakuma et al.,: "Efficient complementary DNA directed expression of human fetal liver cytochrome P450(CYP3A7)in insect cells using baculovirus." Biochem.Mol.Biol.Intem.35. 447-455 (1995)

[Publications] Tsutomu Sakuma et al.: "Isolation and characterization of a new cDNA clone belonging to the cytochrome P450 2C gene subfamily in hamsters." Arch.Biochem.Biophys.319. 267-273 (1995)

[Publications] Ken-ichi Nunoya et al.: "S-oxidation of (+)-cis-3,5-dimethyl-2-(3-pyridyl)thazolidin-4-one hydrochloride by hepatic rat flavin-containing monooxygenase 1 expressed in yeast." Xenobiotica. 25. 1283-1291 (1995)

[Publications] Tsuyoshi Yokoi et al.: "Inhibition of UDP-glucuronsyltransferase by aglycons of natural blucuronides in Kampo medicines using SN-38(7-ethyl-10-hydroxycamptothecin)as a substrate." Japn.J.Cancer Res.86. 985-989 (1995)

[Publications] Tsutomu Sakuma et al.: "Hormonal regulation of the mRNA level of male dominant cytochrome P450 (CYP2C27)in hamster livers." Pharmacol.Res.31. 371-374 (1995)

横井毅北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)