1996 Fiscal Year Annual Research Report

薬物代謝酵素の遺伝子多型の解析

Research Project

Project/Area Number	07672337
Research Institution	HOKKAIDO UNIVERSITY
Principal Investigator	横井毅北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	藤田健一北海道大学, 薬学部, 教務職員 (60281820) 鎌滝哲也北海道大学, 薬学部, 教授 (00009177) 中山佳都夫北海道大学, 薬学部, 助手 (20261323)
Keywords	チトクロームP450 2D6 / チトクロームP450 2A6 / polymorphism / drugmetabolism / 遺伝子診断 / 発がん / 代謝的活性化
Research Abstract	1)CYP2D6の遺伝子レベルでの多型であるA型、B型、O型およびJ9型の頻度について、日本人健常人と癌患者と比較検討した。健常人500名、肺癌患者150名、大腸癌患者98名、神経芽腫患者80名のゲノムDNAを抽出して判定に供した。その結果、どの癌患者とも有意差は認められなかった。 PMおよびEMから単離したCYP2A7遺伝子の塩基配列の解析を行った。CYP2A7 3'-noncording region にはCYP2A6 3'-noncording region と homology の低い配列領域が存在する。PMから単離したCYP2A7 3'-noncording region はこの配列を有していた。一方、さらに下流にもCYP2A7に特異的な配列が存在した。PMから単離したCYP2A7 3'-noncording region はこの配列を有していなかった。この結果より、SM-12502の in vivo 代謝試験よりPMと判定された検体では、CYP2A7 3'-noncording region においてCYP2A7のストップコドンから約80bp下流よりCYP2A6 3'-noncording region に変わっており、CYP2A6が全て欠損していると考えられた。すなわち、SM-12502の代謝を行うCYP2A6が全て欠損していることがPMとなる原因であることを明らかにした。移行この欠損タイプをCYP2A6 whole deletion と命名する。 PCRを用いたCYP2A6 whole deletion の判定法を確立した。2A7 specific sequence 内の2A7特異的な配列にセンスプライマー(2A6-del.S)を、またアンチセンスプライマー(2A6-del.AS)はCYP2A7、CYP2A6両方を認識できるように設計した。増幅後アガロースゲルで泳動するとCYP2A6 whole deletion の場合、364bpのバンドが、EMの場合には379bpのバンドが検出された。この判定法を確立したことにより、従来用いていた判定法であるSac-I-RFLPを用いることなく簡便にCYP2A6 whole deletion を判定できた。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Nunoya et al.: "(+)-cis-3,5-dimethy 1-2-(3-pyridy) thiazolin-4-one Hydrochloride (SM-12502)as a novel substrate for cytochrome P450 2A6 (CYP2A6) in human liver microsomes." J. Pharmacal. Explt. Therap.277. 768-774 (1996)
[Publications] Yokoi et al.: "A new CYP2D6 allele with a nine base insertion in exon 9 in a Japanesepopulation associated with poor metabolizer phenotype." Pharmacogenetics. 6. 395-401 (1996)
[Publications] Nakamura et al.: "CYP2D6 is a principal cytochrome P450 responsible for metabolism of the histamine H1 antagonist promethazine in human liver microsomes." Pharmacogenetics. 6. 449-457 (1996)
[Publications] Takasuna et. al.: "Involvement of β-glucuronidase in intestinal microflora in intestinal toxicity of an antitumor camptothecin derivative irinotecan hydrochloride (CPT-11) in rats." Cancer Research. 56. 3752-3757 (1996)
[Publications] Li et al.: "Perinatal Expression and inducibility of Human CYP3A7 in C57BL/6N Transgenic Mice." Biochem Biophys Res Commun. 228. 312-317 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

薬物代謝酵素の遺伝子多型の解析

Principal Investigator

横井 毅 北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)

Research Products

[Publications] Nunoya et al.: "(+)-cis-3,5-dimethy 1-2-(3-pyridy) thiazolin-4-one Hydrochloride (SM-12502)as a novel substrate for cytochrome P450 2A6 (CYP2A6) in human liver microsomes." J. Pharmacal. Explt. Therap.277. 768-774 (1996)

[Publications] Yokoi et al.: "A new CYP2D6 allele with a nine base insertion in exon 9 in a Japanesepopulation associated with poor metabolizer phenotype." Pharmacogenetics. 6. 395-401 (1996)

[Publications] Nakamura et al.: "CYP2D6 is a principal cytochrome P450 responsible for metabolism of the histamine H1 antagonist promethazine in human liver microsomes." Pharmacogenetics. 6. 449-457 (1996)

[Publications] Takasuna et. al.: "Involvement of β-glucuronidase in intestinal microflora in intestinal toxicity of an antitumor camptothecin derivative irinotecan hydrochloride (CPT-11) in rats." Cancer Research. 56. 3752-3757 (1996)

[Publications] Li et al.: "Perinatal Expression and inducibility of Human CYP3A7 in C57BL/6N Transgenic Mice." Biochem Biophys Res Commun. 228. 312-317 (1996)

横井毅北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)