薬害を防止するための代謝拮抗パラメータを用いる評価系の理論構築

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07672468
• Research Institution: Gifu Pharmaceutical University
• Principal Investigator: 平野 和行 岐阜薬科大学, 薬学部, 教授 (90057365)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 足立 哲夫 岐阜薬科大学, 薬学部, 助教授 (40137063)
• Keywords: インドメタシン / カルボキシエステラーゼ / プランルカスト

Research Abstract

インドメタシンのアミド結合を水解する酵素は、ブタの肝臓ミクロソームに局在する非常に不安定なカルボキシエステラーゼであることを明かにした(km : 68 μM, Vmax : 9 nmol/mg protein/min)。この酵素はマウスのES-maleと高い相同性を有しており、通常エステラーゼの基質として用いられるα-ナフチルアセテートやp-ニトロアセテートは水解しなく、アニラセタム以外の市販のアミドまたはエステル結合に対しては何ら水解作用を示さなかった。ヒトではインドメタシンの代謝物としてアミド結合の水解物が検出されているので、ブタと同様に現在までに報告されていない不安定なエステラーゼに属する酵素の存在が推定され、その役割を明かにすることによってアミド結合を有する薬物の代謝を予測し、相互作用を検討することができるものと考えられる。さらにプランルカストのヒトとラットの代謝様式が異なることを明かにするため、プランルカストを基質としてその酵素を精製した結果、従来から知られている肝臓ミクロゾーム画分のカルボキシエステラーゼ(hydrolase B)で代謝されていることを酵素化学的に証明した。この酵素は、ヒトの肝臓中の酵素とその基質特異性が異なり、プランルカストの代謝に種差が生じたものと考えられた。また、hydrolase Bはアニラセタムのアミド結合にはほとんど作用しなく、プランルカストに対して高い親和性(km :61μM)と高い反応速度定数(Vmax : 234 nmol/mg protein/min)を示した。

Research Products

• [Publications] Tomokazu Fujii: "Variable glyceryl dinitrate formation as a function of gluthathione S-transferase" Biol. Pharm. Bull.19. 1093-1096 (1996)
• [Publications] Keisuke Terashima: "Purification and partial characterization of an indomethacin hydrolyzing enzyme from pig liver" Pharm. Res.13. 1327-1330 (1996)
• [Publications] Libiao Luan: "Purification and characterization of pranlukast hydrolase from rat liver microsomes ; the hydrolase is identical to carboxylesterase" Biol. Pharm. Bull.20. 71-75 (1997)