1995 Fiscal Year Annual Research Report
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07672497
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
櫻林 郁之介 自治医科大学, 医学部, 教授 (80049056)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久保 信彦 自治医科大学, 医学部, 助手 (40214994)
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| Keywords | lipoprotein (a) / apolipoprotein (a) / staudard material / stundardization / epitope analysis / gene expression |
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| Research Abstract |
1.すでに我々が同定した:Lp(a)の免疫学的測定法で重要なクリングルIV領域のペプチドを合成した.このペプチドをリポソーム上にカルボジイミド法で結合させたペプチド-リポソーム結合物は、このペプチドエピトープを認識するモノクローナル抗体に対して,直線性がとても優れた検量線を示す暫定標準物質となることが明らかになった.しかしこの暫定標準物質は、既存の複数のLp(a)測定系に対して示す測定値は僅かであった.
2.エピトープの周辺を,今回合成ペプチドを膜上に合成して,これを抗原して,各種の抗アポ(a)抗体が反応するかを検討した.しかし,これまでの部位以外に,すでに我々が発見した領域以外にモノクローナルLP(a)/アポ(α)抗体が反応する領域を特定することができなかった.さらに,ポリクローナル抗体でも同様の結果であった.
3.報告されているアポ(a)のcDNAからプラスモノゲンとの相同性の乏しい領域にプライマーを設定して,ヒト肝臓cDNAライブラリーを鋳型にPCRをおこない,およそ1.5Kbのバンドを得た.直接シークエンス法で,これは確かにアポ(a)のcDNAのサブクローンであることが確認された.これを大腸菌用および酵母用発現ベクターにつないで各ホストに挿入して,蛋白発現をおこなった.
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[Publications] S. YAMADA et. al: "Design of the antibody production by synthetic peptides and estiblisblislunent on Lp(a) measurement" Preceedings of the XVII world ccngress of anatonic and clinical phthology. 539-543 (1994)
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[Publications] 久保信彦 他: "Lp(a)は動脈硬化と直接関連しているか-動脈硬化等での役割と血中濃度測定の有用性" 臨床病理. 42. 1119-1127 (1994)
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[Publications] 久保信彦: "動脈硬化症マーカーとしてのアポ(a)アイソフォーム分析" 生物物理化学. 39. 315-320 (1995)
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[Publications] 久保信彦 他: "Lp(a)の働きと動脈硬化-動脈硬化発症の独立した危険因子" 日本臨床化学会関東支部会誌. 2. 48-49 (1992)
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[Publications] 久保信彦: "Lp(a)の比濁法による測定の基礎的検討" 臨床検査危機・試薬. 17. 369-371 (1994)
