1996 Fiscal Year Annual Research Report

イオン選択機能膜チャンネルペプチドの分子設計と構造・機能相関・構造因子のTrpと機能因子のGlu及びLysについての考察

Research Project

Project/Area Number	07680634
Research Institution	SAGA UNIVERSITY
Principal Investigator	近藤道男佐賀大学, 理工学部, 教授 (30039250)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	兒玉浩明佐賀大学, 理工学部, 助教授 (80205418)
Keywords	グラミシジンAibアナログ / CDスペクトル / 高次構造 / イオンチャンネル / 疎水性自己会合 / 固相ペプチド合成
Research Abstract	天然物由来の抗菌性ペプチドは、菌体膜のバリヤ-を壊す事が知られている。この様式としてチャンネル形成、膜構造の損傷、膜の可溶化が考えられている。しかし、多くの研究がされてきたアラメチシンにおいてもペプチド間相互作用及び膜への配向様式は未だ解明されていない。今回このAib含有ペプチドのリン脂質膜相互作用の解明のため、Ac-(BKBA)n-NH_2(BKBA-n,n=1-5)及びAc-(AKAA)n-NH2(AKAA-n,n=1-5)、さらにリン脂質膜へのペプチドの親和性解析のため構造因子Trp含有ペプチドの合成を行った。ペプチド合成は固相法で行い、構造はESI-MSで確認した。逆相HPLCでBKBA及びAKAAペプチドは鎖長依存に伴って溶出された。これは長鎖ペプチドでは分子が疎水性相互作用によって会合し、その表面の疎水面が減少していると考えられた。ペプチドの2次構造はCDスペクトルを用い評価した。リン酸緩衝液中でBKBA及びAKAAは共に鎖長依存に伴いヘリックス構造の増加を示し、中性脂質DPPCと酸性脂質DPPC-DPPG中ではBKBAペプチドの顕著なヘリックス構造の誘導が示唆された。一方、AKAAペプチドは酸性脂質上でヘリックス構造を形成したが、中性脂質ではヘリックス構造を示さなかった。膜摂動は蛍光物質カルセイン内包リポソームからの漏出実験により評価した。12残基(n=3)以上では鎖長依存に伴い漏出能が増加した。AKAA-20(n=5)は高濃度(10μM)でも全く漏出能を示さなかった。BKBA-20(n=5)は同様の現象はなく、また他のペプチドにはみられない。B=Ab,K=Lysの機能因子としての興味ある事実が示された。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] A.Kumon et al.: "N-Phosphoarginine Phosphatase (17kDa) and Alkaline Phosphatase as Protein Arginine Phosphatases" J.Biochem.119. 719-724 (1996)
[Publications] T.Yasunaga et al.: "Reversible Affinity Labeling of Opioid Receptors via Disulfide Bonding : Discriminative Labeling of mu and delta Subtypes by Chemically Activated Thiol-containing Enkephalin" J.Biochem.120. 459-465 (1996)
[Publications] K.Sakaguchi et al.: "Effect of Phosphorylation on Tetramerization of the Tumor Suppressor Protein P53" Peptides,Chemistry,Structure and Biology. 252-254 (1996)
[Publications] H.Kodama et al.: "Development of a Direct Quantitative Method for NG-Phosphoarginine Determination in Proteins" Peptides,Chemistry,Structure and Biology. 440-441 (1996)
[Publications] K.Kaibara et al.: "Characteristic Interaction of Ca2+Ions with Elastin Coacervate : Ion Transport Stydy Across Coacervate Layers of alpha-Elastin and Elastin Model Polypeptide,(Val-Pro-Gly-Val-Gly)n" Biopolymers. 39. 189-198 (1996)
[Publications] H.Sakamoto et al.: "Chemical synthesis of phosphrylated peptides of the carboxy-terminal domain of human p53 by a segmant condensation method" Int.J.Pept.Protein Res.48. 429-442 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

イオン選択機能膜チャンネルペプチドの分子設計と構造・機能相関・構造因子のTrpと機能因子のGlu及びLysについての考察

Principal Investigator

近藤 道男 佐賀大学, 理工学部, 教授 (30039250)

Research Products

[Publications] A.Kumon et al.: "N-Phosphoarginine Phosphatase (17kDa) and Alkaline Phosphatase as Protein Arginine Phosphatases" J.Biochem.119. 719-724 (1996)

[Publications] T.Yasunaga et al.: "Reversible Affinity Labeling of Opioid Receptors via Disulfide Bonding : Discriminative Labeling of mu and delta Subtypes by Chemically Activated Thiol-containing Enkephalin" J.Biochem.120. 459-465 (1996)

[Publications] K.Sakaguchi et al.: "Effect of Phosphorylation on Tetramerization of the Tumor Suppressor Protein P53" Peptides,Chemistry,Structure and Biology. 252-254 (1996)

[Publications] H.Kodama et al.: "Development of a Direct Quantitative Method for NG-Phosphoarginine Determination in Proteins" Peptides,Chemistry,Structure and Biology. 440-441 (1996)

[Publications] K.Kaibara et al.: "Characteristic Interaction of Ca2+Ions with Elastin Coacervate : Ion Transport Stydy Across Coacervate Layers of alpha-Elastin and Elastin Model Polypeptide,(Val-Pro-Gly-Val-Gly)n" Biopolymers. 39. 189-198 (1996)

[Publications] H.Sakamoto et al.: "Chemical synthesis of phosphrylated peptides of the carboxy-terminal domain of human p53 by a segmant condensation method" Int.J.Pept.Protein Res.48. 429-442 (1996)

近藤道男佐賀大学, 理工学部, 教授 (30039250)