1995 Fiscal Year Annual Research Report
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07680754
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
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| Research Institution | Chiba Cancer Center (Research Institute) |
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Principal Investigator |
尾崎 俊文 千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (40260252)
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| Keywords | DAN / ゲノム遺伝子 / Two-hybrid法 |
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| Research Abstract |
1)ヒトDAN遺伝子を含むゲノムDNAのクローニングおよび構造解析
ヒトゲノム由来のP1ライブラリーをスクリーニングすることによって、DAN遺伝子の全エキソンを含むゲノムDNAをクローン化することができた。構造解析の結果、ヒトDAN遺伝子は4個のエキソンから構成されていることが明らかになった。また、すべてのエキソン/イントロン境界配列はAG/GTルールに合致していた。興味深いことに、DAN遺伝子の第一イントロン内には、マイクロサテライトマーカーとして知られているCAリピートが存在していた。このCAリピートがマーカーとして有効であれば、LOHの解析を含むゲノム解析が飛躍的に進展しうると期待される。
2) Two-hybrid法によるDAN結合蛋白質遺伝子のクローニング
DAN遺伝子産物と特異的に結合する蛋白質に対するcDNAをクローン化するために、酵母のtwo-hybridシステムを用いて、ラット正常肺由来のcDNAライブラリーに対してスクリーニングを行った。その結果、2個の独立した陽性クローン(DA31,41)が得られた。構造解析の結果、両遺伝子とも新規の蛋白質をコードしていることが明らかになった。現在、この特異的相互作用の生物学的意義について検討している。
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[Publications] Kondoh,K. et al.: "DAN gene products has an affinity with Ni^<2+>." Biochem. Biophys. Res. Comm.216. 209-215 (1995)
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[Publications] Ozaki et al.: "Molecular cloning and characterization of a novel gene homologous to cdc37" DNA Cell Biol.14. 1017-1023 (1995)
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[Publications] Ozaki, T. et al.: "Sequence-specific DNA binding activity of rat cdc37 gene product" FEBS Letters. 375. 155-158 (1995)
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[Publications] Ozaki, T. et al.: "Cloning of mouse DAN cDNA and its down-regulation in transformed cells." Jpn. J. cancer Res.87. 58-61 (1996)
