遺伝子発現よりとらえた骨形成能を有する生体材料の開発

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07680952
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Research Institution: Nara Medical University
• Principal Investigator: 大串 始 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (80213669)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田端 司郎 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (40041652) ; 土肥 祥子 奈良県立医科大学, 医学部, 助教授 (50155628)
• Keywords: 骨形成 / 生体材料 / 遺伝子発現

Research Abstract

7週齢のラットの骨髄細胞を採取し15%FCSを含むMEM培地で培養した。約1週間でconfluentになり、trypsin処理の後Vitamin C,Glycero-phosphate,Dexamethasoneを培地に加えsubcultureした。Subcultureは細胞数約4x10^4個を直径35mmの培養皿において行った。約2週前後からin vitroの骨形成が始まった。このsubcultureの時に種々の平板状のセラミックス等の材料上(直径34mm)でも培養をおこった。ラットBGP(Bone Gla Protein)抗体を我々はすでに作成していたので、これを使用してのラットBGP測定実験をおこないBGPの定量実験をおこなった。またALP染色、Alizarin red S染色により定性的判定も可能であった。BGP、ALPのcDNAもすでにクローニングしていたのでこれらのプローブを用い培養細胞よりRNAを抽出したのち遺伝子発現(Northern blot)の実験もおこなった。この遺伝子発現の実験により、骨芽細胞の活性の検定をおこなえた。

Research Products

• [Publications] H.OHGUSHI,et al.: "In Vitro bone formation by rat marrow cells" J.Biomed.Mut.Res. (in press).
• [Publications] H.OHGUSHI,et al.: "Osteogenic differentiation of cultured marrow cells on glassceramics" J.Biomed Mat.Res.(in press).