21番染色体転座によるAML1の機能変化と白血病発症機構の解明

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07770859
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 田中 智之 東京大学, 医学部(病), 助手 (50227154)
• Keywords: 白血病 / AML1 / AML1 / Evi-1 / 染色体転座 / 転写因子

Research Abstract

今回我々は,AML1の血液細胞の分化・増殖における機能,ならびに転写制御における活性を検討した.その結果,1. AML1aは,32Dc13細胞の顆粒球への分化を抑制し,さらにAML1bは,このAML1aの作用をキャンセルする.2. AML1bはPEBP2 siteに対し転写活性を有する.AML1aは,それ自身は転写活性化能をもたないが,AML1bによる転写活性をdominantに抑制する.3. AML1aは,AML1bに比べ高いaffinityでPEBP2 siteに結合する.ことが明らかとなった.3.により,AML1aのAML1bに対するdominant negativeな作用は,PEBP2 siteへの結合の競合によるものであると考えている.また,1.と2.の結果より,AML1による転写活性化が,血液細胞のmyeloid系への分化に必須なものであることが推定される.
次に、AML1の構造異常がどのようなメカニズムでleukemic transformationをひきおこすか調べるために、t(3 ; 21)により産生されるAML1/Evi-1融合タンパク質の機能解析を行った。この結果,融合タンパク質が転写因子として独立した2つの機能(1. AML1による転写活性化へのdominant-negativeな作用.2. Evi-1の第2zinc fingerドメインに依存したAP-1活性の上昇作用)を担うことが判明した。さらに,、AML1/Evi-1のmyeloid系への分化に対する影響を解析するために、32Dc13細胞において、AML1/Evi-1融合タンパク質および第2zinc fingerドメイン欠失変異体をstableに発現するクローンを樹立して解析した。その結果、融合タンパク質のAML1由来部位とEvi-1由来部位は、各々独立してmyeloid系への分化の抑制に関与することが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Tomoyuki Tanaka et al.: "An acute mycloid leukemia gene, AML1, regulates hemopoietic myeloid cell differentiation and transcriptional activation antagonistically by two alternative spliced forms." EMBO J.14,. 341-350 (1995)
• [Publications] Tomoyuki Tanaka et al.: "Dual functions of the AML1/Evi-1 chimeric protein in the mochanism of leukemogenesis in t(3 ; 21) leukemias." Mol. Cell. Biol.15,. 2382-2392 (1995)
• [Publications] Kozo Tanaka et al.: "Increased expression of AML1 during retinoic acid-induced differentiation of U937 cells." Biochem. Biophys. Res. Commun.211,. 1023-1030 (1995)
• [Publications] Kinuko Mitani et al.: "Growth inhibition of leukaemic cells carrying the t(3 ; 21) by the AML1/EVL-1-specific antisense oligonucleotide." Br. J. Haematol.90,. 711-714 (1995)
• [Publications] Mineo Kurokawa et al.: "The AML1/Evi-1 fusion protein generated in the t(3 ; 21) translocation exhibits transforming activity on Ratl fibroblasts with dependencce on the Evi-1 Sequence." Oncogene. 11,. 833-840 (1995)
• [Publications] Mineo Kurokawa et al.: "Overexpression of the AML1 proto-oncoprotein in NIH3T3 cells leads to neoplastic transformation depending on the DNA-binding and transcriptional potencies." Oncogene. (in press).