1995 Fiscal Year Annual Research Report
Fas以外の新しいアポトーシス誘導抗原のクローニング
Project/Area Number |
07770872
|
Research Institution | Kumamoto University |
Principal Investigator |
畑 裕之 熊本大学, 医学部, 助手 (70271129)
|
Keywords | 多発性骨髄腫 / アポトーシス / Fas / Apo-1(CD95) / モノクローナル抗体 / サイトカイン |
Research Abstract |
Fasを介さないアポトーシスを誘導する,骨髄腫細胞表面抗原のクローニングを試みた.骨髄腫細胞株KHM11を免疫原として用い,型のごとくマウスハイブリドーマを作成した.二回のcell fusionで103個のcloneを得た.96well plateに抗マウス-IgG抗体をcoat後,ハイブリドーマ上清中のモノクローナル抗体をクロスリンクさせ,最後にKHM11を添加し,その増殖をtritium thymidineの取り込みで測定した.その結果,すべてのcloneは,KHM11の増殖を最大10%程度増加させ,目的とするアポトーシス誘導抗体は得られなかった.フローサイトメトリーによる解析でもcell shirinkingを誘導するクローンが2個得られたものの,アポトーシスの誘導は確認できなかった.これらは当初の目的とは異なった結果であったが,ハイブリドーマfeeder用のマウス腹腔マクロファージ上清のみでもKHM11の増殖刺激が得られたことから,マクロファージ由来の何らかのサイトカインがKHM11の増殖刺激因子として作用していることが示唆された.事実IFN gammaはKHM11の増殖を刺激することが確認された. 一方,骨髄腫細胞にはFasを介さない自然の培養条件でも起こるアポトーシスがあることが確認され,その程度は細胞株,症例間で異なっていることが確認された.今回は,アポトーシスを誘導する新しい表面抗原は得られなかったが,今後,このようなアポトーシスが惹起されるメカニズムを解明したい(平成8年度奨励A申請中).
|
-
[Publications] H.Hata et al.: "Red blood cell volume (MCV) as a new prognostic factor of multiple myeloma." Eur.J.Haematol.54. 57-58 (1995)
-
[Publications] H.Hata et al.: "Expression of Fas/Apo-1 (CD95) and apoptosis in tumor cells from patients with plasma cell disorders." Blood. 86. 1939-1945 (1995)
-
[Publications] T.Sonoki et al.: "Establishment of the novel B acute lymphoblastic leukemia (FAB L3) cell line KHM-10B with a 13q34 abnormality and constitutive expression of c-myc and max during cell cycle." Leukemia. 9. 2093-2099 (1995)
-
[Publications] H.Matsuzaki et al.: "Serum amino acid disturbance in multiple myeloma with hyperammonemia." International J.hematology. 61. 131-137 (1995)
-
[Publications] T.Sonoki et al.: "Aggressive CD5-positive diffuse large B cell lymphoma showing c-myc rearrangements developed in a patient with autoimmune hemolytic anemia." International J.hematology. 63. 71-76 (1996)
-
[Publications] H.Hata et al.: "Fas/Apo-1 (CD95) -mediated and CD95-independent apoptosis of malignant plasma cells (Review)." Leukemia and lymphoma. (in press).