1995 Fiscal Year Annual Research Report
Optical Decouplingを利用した紫外共鳴ラマン分光法の開発:蛋白質内特定芳香族アミノ酸残基ラマンバンドの選択的検出
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07780584
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
紙中 庄司 久留米大学, 医学部, 助手 (30211858)
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| Keywords | 紫外共鳴ラマン / Optical Decoupling / 蛋白質構造解析 / 生体分子分光学 / 振動分光学 |
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| Research Abstract |
はじめに、エキシマーレーザー励起色素レーザーとβ-BaB_2O_4で得られる220nmパルス光をOptical Decoupling用の励起光源とし、CW Ar^+イオンレーザーの第2高調波(244nm)をUVRR励起用プローブ光に使って実際にトリプトファン(Trp)水溶液のOptical Decoupling紫外共鳴ラマン(UVRR)スペクトルの測定をした。しかしプローブ励起光の強度が弱いためにS/Nが十分高いスペクトルを得ることはできなかった。そこで、プローブ光源にエキシマー励起色素レーザーとβ-BaB_2O_4で得られる244nmパルス光を使い、同様の測定を試みた。プローブ光がパルス光なので、Optical Decouplingが起きないように十分弱い光強度でプローブ光を試料に照射した。このとき、Optical Decoupling用ポンプ光にはNd;YAGレーザー3倍波を水素ガスに入射して得られるアンチ・ストークス2次の誘導ラマン光(223.1nm)を用いた。ポンプ光とプローブ光を完全に一致させることは使用レーザーの性格上不可能なために、光検出器はポンプ光に同期させてTrp基底分子のOptical Decouplingが起きている時間だけプローブ光照射による散乱光を検出した。
以上のような変更を加えて、Trp水溶液のOptical Decoupling UVRRスペクトルをポンプ光強度を変えて測定し、ポンプ光なしのUVRRスペクトルとの差をとった。その結果、予想された通りあるポンプ光強度を越えるとUVRRスペクトルの強度が減少し始めることが分かった。この結果から、TrpにおいてOptical Decouplingを実際に観測することができる事を初めて示すことができた。その強度減少の傾向は223.1nm励起でのUVRRスペクトル強度の飽和現象に似ていることも突き止め、今後その傾向を定量的に調べて行くことを考えている。また本研究では2台のレーザーの発振時期を1ns以内に納めることができないため、スペクトルのS/Nが当初考えていたよりもよくないことが明らかになった。そこで1台のNd;YAGレーザーを光源としてポンプ光とプローブ光を同時に発生させる方法に変更して、実験することにしている。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Shoji Kaminaka: "A Novel Spinning Cell System for UV Resonance Raman Measurement of Trp Powder and Small Volume of Mutant Carbonmonoxy Hemoglobin in Back-Scattering Geometry." Appl.Spectrosc.49. 685-687 (1995)
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[Publications] Masoko Nagai: "Ultraviolet Resonance Raman Studies of Quaternary Structure of Hemoglobin Using a Tryptophan β 37 Mutant." J.Biol.Chem.270. 1636-1642 (1995)
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[Publications] Masako Nagai: "Ultraviolet Resonance Raman Studies of Hemoglobin Quarternary Structure using a tyrosine-α 42 Mutant: Changes of α1β 2 Subunit Interface upon the T→R Transition." J.Mol.Struct.(in press). (1996)
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[Publications] Shoji Kaminaka: "Ultraviolet Resonance Raman Study of Fe-Zn Metal-Hybrid Hemoglobins as a T-State Model." Proc.XVth Int.Confer.Raman Spectrosc.(in press). (1996)
