1996 Fiscal Year Annual Research Report
免疫電子顕微鏡法を用いたC型肝炎ウイルス粒子の中和に関する研究
Project/Area Number |
07807056
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Research Institution | MIE UNIVERSITY |
Principal Investigator |
垣内 雅彦 三重大学, 医学部, 助手 (70214244)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡辺 省三 三重大学, 保健管理センター, 教授 (20134934)
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Keywords | C型肝炎ウイルス / ウイルス粒子 / 電子顕微鏡 / 金コロイド / PCR法 / モノクローナル抗体 / 血漿 / コア粒子 |
Research Abstract |
我々は、HCV粒子は長さ7nmの繊細なスパイクを持つ直径約60nmの球形粒子であり、その内部に直径30〜35nmのコア粒子を有していることを明らかにし、英国紙Journal of General Virology,75,1755-1760,1994に論文を発表した。また、平成6年3月23日に朝日新開社、日本共同通信社とNHKにこの研究結果を発表した。遺伝子組み換えワクチニアウイルスの発現糖蛋白質(HCV-E2/NS1抗原,subtype 1b)を免疫原として作製したウサギポリクローナル抗HCV-E2/NS1抗体(RR-6)またはマウスモノクローナル抗HCV-E2/NS1抗体(6種類)を用いた金コロイド免疫電子顕微鏡的研究を行い。HCV粒子の表面にE2/NS1抗原が分布していることを明らかにした。浮上密度1.23g/mlを中心とする分画中に直径30〜35nmのコア様粒子を観察した。ウサギポリクローナル抗HCV-core抗体(RR-8)またはマウスモノクローナル抗HCV-core抗体(515)を用いた金コロイド免疫電子顕微鏡的研究を行い、HCVコア粒子の超微形態を明らかにした。血清中にはHCV粒子およびコア粒子の免疫複合体が多く存在するため、現在HCV全長遺伝子を発現させた培養肝細胞の培養上精中のHCV粒子と抗HCV-El抗体および抗HCV-E2/NS1抗体との反応を確認した。
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[Publications] M.Kaito,S.Watanabe,M.Kohara: "Distribution of E1 and E2/NS1 Antigen on Hepatitis C Virus Particle Detectal by Immunoelectron Microscopic Study" IX TRIENNIAL INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON VIRAL HEPATITIS AND LIVER DISEASE abstract volume. 156-156 (1996)
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[Publications] 石田聡、垣内雅彦、渡辺省三: "HBs抗原陰性供血者血中のウイルス様粒子に関する研究(第6報)-HCV Core粒子の超微形態-" 肝臓. 37(1). 112-112 (1996)
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[Publications] T.Wakita,M.Kaito,S.Watanabe: "Maturation of Hepatitics C Virus Core Protein in Vivo" IX TRIENNIAL INTERNATIONAL SYMPOSIUM ON VIRAL HEPATITIS AND LIVER DISEASE abstract volume. 163-163 (1996)
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[Publications] 小原道法、垣内雅彦、渡辺省三: "C型肝炎ウイルス遺伝子の全長cDNAクローンを用いた複製過程の解析" 第44回日本ウイルス学会総会アブストラクト. 184-184 (1996)
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[Publications] 渡辺省三、垣内雅彦、小原道法: "C型肝炎ウイルス粒子(1)金コロイド免疫電顕法によるC型肝炎ウイルス粒子の超微形態に関する研究" 第19回犬山シンポジウム. 9-14 (1996)
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[Publications] 渡辺省三、垣内雅彦、小原道法: "C型肝炎ウイルス粒子" 肝臓病学の進歩. 22. 30-35 (1996)