1995 Fiscal Year Annual Research Report
TFIID内Bromodomainの相互作用因子の機能解析
Project/Area Number |
07808077
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
山本 融 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (10251480)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀越 正美 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教授 (70242089)
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Keywords | TATAボックス結合因子 / TFIID / 転写調節 / CCG1 / Bromodomain / 転写因子 / クロマチン転写 / two-hybrid法 |
Research Abstract |
Bromodomainはグローバルに作用する新しいタイプの転写因子に広く含まれている構造ドメインで転写因子間相互作用に関わり、クロマチン転写などに働くものであると考えられている。一方、TFIIDはクロマチン転写に関わると考えられているもののどのような段階にどのように関わるかは明らかでないが、ここに示したBromodomainをもつサブユニットCCG1を持つ。したがって、このBromodomainを手がかりにTFIIDの持つクロマチン転写における機能的役割を明らかにする目的で以下の解析を進めた。 1)Bromodomainと相互作用する新しいタイプの因子をコードするcDNAの単離 Bromodomainと相互作用する因子をコードするcDNAを蛋白質-蛋白質相互作用活性を指標にしたスクリーニング法、すなわちtwo-hybrid法により単離した。そのうち、5種は未知因子であったが2種の因子は互いに似ているばかりでなく、出芽酵母より遺伝学的に単離されていた因子のヒトホモログでクロマチン転写に関わるであろう性質を持っていた。 2)Bromodomainと相互作用する活性で単離した因子の性状解析 単離した上述の2種の因子とCCG1のBromodomainとの相互作用の特異性検定後、この因子の局在性や発現パターンを調べたところ核内に存在すること、一方はどの組織でも発現しているが、他方は幾つかの組織でしか発現しておらず、組織特異的な活性を担い得る因子であろうことが判明した。しかもこの因子は既存の転写因子の構造モティーフを持たないことから、新しいタイプの転写調節反応に関わるであろうことが示唆された。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] X,tang et al,: "Cooperativity between an upstream TATA-like sequence and a CCA repeated element mediates E1A-dependent negative repression of the H-2K°class I gene" J.Biol.Chem.270. 2327-2336 (1995)
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[Publications] G.Mizuguchi et al.: "c-Myb repression of c-erbB-2 transcription by direct binging to the c-erbB-2 promoter" J.Biol.Chem.270. 9384-9389 (1995)
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[Publications] T.Yamamoto et al.: "Rapid preparation of plasmid templates suitable for a DNA sequencer without RNase treatment" Nucleic Acids Res.23. 3351-3352 (1995)
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[Publications] K.Hisatake et al.: "Evolutionary conservation of human TATA-binding-polypeptide-associated factors TAF1131 and TAF1180 and interactions of TAF1180 with other TAFs and with general transcription factors" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.92. 8195-8199 (1995)
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[Publications] S.Hasegawa et al.: "A Sequence of a Xenopus laevis TFIID subunit reveals remarkable conservation among vertebrates" Gene. 164. 369-370 (1995)
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[Publications] T.Umehara et al.: "Isolation and characterization of a cDNA encoding a new type of human transcription elongation factor S-II" Gene. 167. 297-302 (1995)