動物組織リゾホスオ-リパーゼのcDNAクローニングと細胞内シグナル伝達への関与

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07857013
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 杉本 博之 群馬大学, 医学部, 助手 (00235897)
• Keywords: リゾホスホリパーゼ / トランスアシラーゼ / パルミチン酸 / リゾホスファチジルコリン / ホスファチジン酸

Research Abstract

1.ラット肝臓25Kリゾホスホリパーゼの抗体を用い,ラット肝臓λgt11cDNAライブラリーのスクリーニング行ない,本酵素のcDNAクローンを得,全アミノ酸配列を決定した。その中には,セリンエステラーゼの活性中心に特徴的なGXSXG配列を含んでいた。また,DMSO刺激によりHL60細胞が好中球に分化する際,本酵素が誘導されることがWestern blotにより確認された。しかし,mRNA量には変化がみられず,調節は転写後の段階で行なわれていると推定された。
2.ラット肝臓可溶性画分からDEAEセルロース,オクチルセファロース,硫安分画,ゲル濾過,ブルーセファロース,ヒドロキシアパタイト,HPLC-DEAEを使用し,60Kのリゾホスホリパーゼ/トランスアシラーゼを精製した。この均一な標品を使用してウサギを免疫し抗体を得た。現在この抗体を用い,ラット肝臓λgt11cDNAライブラリーのスクリーニング行ない,本酵素と思われるcDNAを得たところである。

Research Products

• [Publications] Hiroyuki Sugimoto, Hiroaki Hayashi et al.: "Purification, cDNA cloning, and regulation of lysophospholipase from rat liver." The Journal of Biological Chemistry. 271 (in press). (1996)
• [Publications] Hiroaki Sunaga, Hiroyuki Sugimoto et al.: "Purification and properties of lysophospholipase isoenzymes from pig gastric mucosa." Biochemical Journal. 308. 551-557 (1995)
• [Publications] Hiroyuki Sugimoto & Satoshi Yamashita: "Purification, charachterization, and inhibition by phosphatidic asid of lysophospholipase-transacylase from rat liver." The Journal of Biological Chemistry. 269. 6252-6258 (1994)