1996 Fiscal Year Annual Research Report
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08044188
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
原田 昌彦 東北大学, 農学部, 助手 (70218642)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
ヴィンタースベルガー ウ ウィーン大学, ガン研究所, 準教授
スティルマン デビッド ユタ大学, 細胞ウィルス分子生物学部門, 準教授
クーパー ジョン A ワシントン大学, 医学部, 準教授
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| Keywords | アクチン関連タンパク質 / ヒストン / クロマチン / タンパク質間相互作用 / 出芽酵母 / 遺伝子発現 |
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| Research Abstract |
Act3pには、他のアクチンファミリーには存在しない挿入アミノ酸領域が存在し、この領域と他のタンパク質との相互作用がAct3p特異的な機能の発現に寄与していると考えられる。原田はこのAct3pの挿入領域と相互作用するタンパク質をfar-western blotで検索した。その結果、酵母核をDNaseI処理することにより調製したクロマチン画分では、コアヒストンに相当する分子量のタンパク質成分にシグナルが検出されること、精製したニワトリのコアヒストンにこの領域が結合すること、が示された。しかし一方で、酵母の細胞質のいくつかのタンパク質にも、この領域が結合することも示された。これらの結果は、その特異性は高くないものの、核においてはAct3pがコアヒストンと相互作用する能力をもつことを示唆している。さらに、原田はスティルマン、ク-パ-らと共同で、Two-hybrid systemの系を用いて、Act3pの他の領域と相互作用するタンパク質の検索も行っている。現在、いくつかの候補のクローンを得ており、今後さらにこの解析を行う予定である。
スティルマンは、ACT3遺伝子の点変異がクロマチンの高次構造を介して酵母のいくつかの遺伝子の発現制御に影響を与えることを遺伝学的に示した。今後はAct3pによるクロマチン構造の維持や変化の分子的な機構について、さらに共同で研究を進める予定である。
ヴィンタースベルガ-は、原田と共同で作製した変異ACT3遺伝子を酵母に導入し、現在その解析を行っている。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Achafer,D.A.他: "Dynamics of capping protein and actin assemblyin vitro : Uncapping barbed ends by polyphosphoinositides" J. Cell Biol.135. 169-179 (1996)
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[Publications] Sizonenko,G.I.他: "Mutational analysis of capping protein function in Saccharomyces cerevisiae" Mol. Biol. Cell. 7. 1-5 (1996)
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[Publications] Hart,M.C.他: "Mapping of the mouse actin capping protein alpha subunit genes and pseudogenes" Genomics. (印刷中). (1997)
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[Publications] Hopmann,R.他: "Actin organization,bristle morphology,and viability are affected by actin capping protein mutations in Drosophila" J. Cell Biol.133. 1293-1305 (1996)
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[Publications] Waddle,J.A.他: "Movement of cortical actin patches in yeast" J. Cell Biol.132. 861-870 (1996)
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[Publications] Dohrmann,P.R.他: "Role of negative regulation in promoter specificity of the homologus transcriptional activators Ace2p and Swi5p" Mol. Cell. Biol.16. 1746-1758 (1996)
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[Publications] Yu,W.他: "Identification of SLF1 as a new cooper homeostasis gene involved in copper sulfide mineralization in Saccharomyces cerevisiae" Mol. Cell. Biol.16. 2464-2472 (1996)
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[Publications] Jiang,Y.W.他: "Epigenetic effects on yeast transcription caused by mutations in an actin-related protein present in the nucleus" Genes Dev.10. 604-619 (1996)
