1996 Fiscal Year Annual Research Report
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08044204
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
杉野 明雄 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (90231737)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
DIFFLEY John Inperial Cancer Research Fund. The Clare, 主任
CAMPBELL Jud California Institute of Technology Biolo, 教授
TYE BikーKwoo Section of Biochemistry and Molecular an, 教授
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| Keywords | 出芽酵母 / 染色体DNA複製 / 複製ライセンス因子 / Mcm蛋白群 / 複製開始因子 / ORC / Dbf-Cdc7複合体 / DNAポリメラーゼ |
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| Research Abstract |
出芽酵母S.cerevisiaeの染色体DNA複製開始にはprotein kinaseであるCdc7蛋白が必須である。このprotein kinaseは同じくDNA複製開始に必要なDbf4蛋白と複合体を形成することによって活性化されることが知られている。しかしこのkinaseがリン酸化する蛋白は明らかにされていなかった。本共同研究により、出芽酵母DNA複製ライセンス因子であるMcm蛋白群(5種類のMcm蛋白(Mcm2-6)よりなる)のうちMcm2,Mcm3,Mcm4及びMcm6がin vitroでCdc7/Dbf4 protein kinaseでリン酸化されることを、また遺伝学的及び生化学的手段を使って、in vivoでもCdc7/Dbf4 protein kinaseが直接これらのMcm蛋白群と相互作用しリン酸化していることを明らかにした。従って、これらの結果からCdc7/Dbf4 protein kinaseのリン酸化により複製ライセンス因子Mcm蛋白群の働きを制御されていると考えられる。一方、Dbf4蛋白は複製開始因子であるORC複合体を介し、複製開始部位に結合していることが知られている。しかしCdc7/Dbf4 protein kinase自身は、ORC複合体を構成している蛋白をin vitroでリン酸化することが出来なかった。従って、Mcm蛋白群の一部の蛋白はORC複合体と相互作用していることが明らかにされていることから、恐らく、Cdc7/Dbf4 protein kinaseはMcm蛋白群をリン酸化することによりMcm蛋白群のライセンス因子としての活性を調節し、その結果、ORC複合体のinitiation factorとしての活性を調節していると考えられる。
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[Publications] K.Sugimoto: "Rfc5,a small subunit of replication factor C complex,couples DNA replication and mitosis in budding yeast." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 93. 7048-7052 (1996)
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[Publications] K.Hashimoto: "The second subunit of DNA polymerase III (δ)is encoded by the HYS2 gene and is required for highly processive DNA synthesis in S.cerevisiae." J.Biol.Chem.272(in press). (1997)
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[Publications] V.Noskov: "The RFC2 gene encoding the third largest subunit of the RF-C complex is required for chromosomal DNA replication and cell cycle checkpoint in the yeast S.cerevisiae." Mol.Cell.Biol.17(in press). (1997)
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[Publications] M.Lei: "Mcm proteins are phosphorylated by Cdc7/Dbf4 protein kinase at the G1/S transition." Cell. (in press). (1997)
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[Publications] 杉野 明雄: "Surgery Frontier-アポートシスと核" メディルレビュー社, 5 (1996)
