1997 Fiscal Year Annual Research Report
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08102008
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
西本 毅治 九州大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (10037426)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
東 義明 九州大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (40294954)
野口 英史 九州大学, 大学院・医学系研究科, 特別研究員(PD)
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| Keywords | 細胞周期 / Rcclp / Ran / Gtrlp / RagA / Yrb2p / Crmlp / Cdc25B |
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| Research Abstract |
細胞複製を遺伝子のレベルで研究する目的で、欠損のため細胞周期進行が停止する、またはアポトーシスが起る遺伝子群を明らかにしその機能を解明すると言う目的のために次の三つの柱を立てて研究を行なっている。柱1。細胞複製温度感受性変異の分離。柱2。変異遺伝子の分離と同定。柱3。分離された遺伝子機能の解明。柱1については、今年度は新たな進展はなかった。柱2についてはtsBN821の温度感受性変異を相補するヒト遺伝子の分離を精力的に行ったが、自然突然変異復帰株が多くて分離できなかった。新たな効率の良いヒトDNAによる形質転換法の開発を行う必要がある。柱3では、分離した遺伝子の解析で大きな進展があった。1)Rcclpのモノクローナル抗体を分離しそのエピトープが先に酵素化学反応の解析から推測したRanとの結合領域にあることを確定した。2)酵母Gtrlpに相当するヒトRagAが酵母のGtrlp欠損を相補し、さらにRagAがGTPまたはGDP結合型に応じて細胞内の分布が変化することを発見した。3)出芽酵母のRan相同体Gsplpの温度感受性変異株を分離した。その結果、タンパク質の核移行は全ての変異株で欠損していたが、mRNAの核外移行は欠損しているものとそうでないものがあった。Ranのエフェクターに色々な因子があることが推測された。3)YRB2遺伝子の破壊は酵母を殺さないが、タンパク質の核外移行に欠損があり、Crmlpの発現により相補された。4)MTOC(Microtubule Organizing Center)の形成にRanが関与していることが示唆された。5)長年の課題であったRCClが欠損したときに見られる未成熟染色体凝縮に必須なタンパク質としてCdc25Bが同定された。
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[Publications] E.Noguchi: "Yrb2p,Nup2p-related yeast protein has functional overlap with Rnalp,yeast RanGAP protein." Mol.Cell.Biol.17. 2235-2246 (1997)
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[Publications] H.Goto: "A single point mutation in HCF causes temperature-sensitive cell-cycle arrest and disrupts VP16 function." Genes & Develop.11. 726-737 (1997)
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[Publications] T.Makishima: "The highly conserved DADl protein involved in apoptosis is required for N-linked glycosylation." Genes to Cells. 2. 129-141 (1997)
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[Publications] H.Nishijima: "A dual-specificity phosphatase Cdc25B is an unstable protein and triggers p34^<cdc2>/cyclin B activation in hamster BHK21 cells srrested with hydroxyurea." J.Cell Biol.138. 1105-1116 (1997)
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[Publications] Y.Azuma: "Inhibition by anti-RCCl monoclonal antibodies of RCCl-stimulated guanine nucleotide exchange on Ran GTPase." J.Biochem.122. 1133-1138 (1997)
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[Publications] M.Funakoshi: "Xenopus cyclin Al can associate eith Cdc28 in budding yeast,causing cell-cycle arrest with an abnormal distribution of nuclear DNA." Genes to Cells.2. 329-343 (1997)
