1996 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
08256102
|
|---|
| Research Institution | Teikyo University |
|---|
Principal Investigator |
高野 貴子 帝京大学, 医学部, 助教授 (50236246)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山内 泰子 帝京大学, 医学部, 助手 (40246038)
高野 薫 筑波大学, 物質工学系, 助教授 (60133005)
|
|---|
| Keywords | 高圧力 / 生存率 / 細胞死 / ネクローシス / アポトーシス / NB1 |
|---|
| Research Abstract |
ヒト由来の培養細胞を用いて、高圧力による細胞死について以下の結果が得られた。使用した細胞は正常リンパ芽球(EB3)、B cell lymphoma cell line(Ramos)、Neuroblastoma cell line(NB1)等である。高圧発生装置は共同研究者が独自に開発した結晶解析用装置で、細胞を培養液中に浮遊させたままで、高圧かつ一定の温度管理下におくことができる。圧力処理の条件は、一定の圧力で30分間、37℃の加圧とした。
1,EB3およびNB1の除圧直後の生細胞率は、85MPa以下の加圧では100%に保たれ、180-200MPaで0%になった。85MPaから200MPaの間では生細胞率は圧力増加に従ってSigmoidal curveを描いて減衰した。50%生細胞率は、約130-150MPaであった。
2,除圧後CO_2インキュベータ-内で培養を継続し、継時変化を観察した。100MPa(EB3)と120MPa(NB1)の加圧後の場合はネクローシス細胞が漸増し、8時間後からアポトーシス細胞が出現し、以後16時間まで増加した。50MPa(EB3)の場合は除圧後アポトーシス細胞はみられず、細胞数の増加と細胞分裂が圧力処理後も起こっていた。圧力誘起アポトーシスは蛍光顕微鏡および電子顕微鏡による形態観察のほかTUNEL法により生化学的に検出した。
3,高圧力処理によりDNA複製は顕著に障害され、細胞死を引き起こす圧力よりも低い圧力で障害された。
4,Ramosの除圧直後の生細胞率は、25MPaまでは100%で、200MPaでは全部の細胞が死滅し、50%生存率は約100MPaであり、1より低かった。
5,アポトーシスに関連する遺伝子産物の発現量を調べるために、p53,bcl-2,bcl-x_L,baxなどの抗体を用いてWestern blottingによる解析を行なっている。各細胞で発現量が異なり、現在加圧との関連を解析中である。
|
Research Products
(6 results)
-
[Publications] Takako Takano: "Assignment of the Dentatorubral and Pallidoluysian Atrophy・(DRPLA) Gene to 12p13.31 by Fluorescence in Situ Hybridization." Genomics. 32・1. 171-172 (1996)
-
[Publications] Takako Takano: "Interstitial Deletion of Chromosome 1g[del(1)(q24q25.3)]Identified by Fluorescence In Situ Hybridization and Gene Dosaye Analysis of Apolipoprotein A-II,Coagulation Facter V,and Antithrombin III." American Journal of Medical Genetics. 68. 207-210 (1997)
-
[Publications] Kaoru J.Takano: "Development of an Optical Liquid High Pressure Cell and its Application to Visual Observation of Pressure-Driven Crystal Growth." Journal of Crystal Growth. 171. 591-601 (1997)
-
[Publications] Kaoru J.Takano: "Effect of Hydrostatie Pressure on the Crystallization of Lysozyine Based on in situ Observation." Journal of Crystal Growth. 171. 554-557 (1997)
-
[Publications] Takako Takano: "Assignment of Alzheimer's presenilin-1(PS-1)gene to 14q24,3 by fluorescence in situ hybridization." Neuroscience Letters. 214. 69-71 (1996)
-
[Publications] Takako Takano: "Assignwent of Alzheimer's presenilin-2(PS-2)gene to 1q42,1 by fluorescence in situ hybridization." Neuroscience Letters. 221. 205-207 (1997)
