心筋細胞のアポトーシス誘導機構と心筋症病態形成に果たす役割に関する研究

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08258215
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 松森 昭 京都大学, 医学研究科, 講師 (70135573)
• Keywords: アポトーシス / ウイルス / 心筋炎 / Fas抗原 / 虚血再潅流 / 免疫応答細胞

Research Abstract

(1)DBA/2マウスにウイルスを接種することにより惹き起こした心筋炎マウス心臓より、DNAを抽出し、digoxigenin‐dUTPにより3末端標識し、アガロース電気泳動を行い、アポトーシスに特有なDNAラダーの検出を行った。ウイルス接種後3日目の心臓ではDNAラダーは認められないが、5日目よりアポトーシスが出現し、14日目まで明らかなDNAラダーを認めた。定量化したところ、DNAラダーの最大は細胞浸潤、心筋壊死が広範囲で認められる7日目であった。一方、心臓切片標本を作成し、In Situ Apoptosis有無につき検討した。ウイルス接種後5日目よりアポトーシスが出現し、7日目にはその部位は広汎にわたっていた。その後14日目でもアポトーシスが持続していた。また、免疫組織化学によりFas抗原とFasリガンドの発現を調べたところ、両者とも正常心では発現が殆ど見られないのに対して、ウイルス接種後7日目の心臓切片で浸潤細胞の膜表面に強い発現を認めた。この結果、ウイルス感染による心臓細胞死にFas抗原‐Fasリガンドシステムを介したアポトーシスが関与している可能性が示唆された。この時期、ウイルス感染マウス胸腺や脾臓において活発なアポトーシス(DNAラダー)を認めた。さらに、Fas抗原に遺伝子変異がある1pr/1prマウスを用いて同様のウイルス接種実験を行ったところ、心臓内のアポトーシスはDNAラダーで著減する一方、心筋壊死の増加によりかえって死亡率が増加した。これは、免疫応答細胞のアポトーシスを抑制すると、ウイルスの除去がうまくいかず死亡率を高める結果となったことが示唆された。これらの結果は平成8年11月、第69回アメリカ心臓病学会にて発表された。
(2)ウサギの左冠動脈回旋枝を20分間閉塞することにより作成した虚血再潅流モデルにおいてアポトーシスの有無につき検討した。再潅流後1日〜3日目の心臓から抽出したDNAを用いて、明らかなDNAラダーが出現した。また、心臓切片標本をではマクロファージの浸潤部位に核染色にてアポトーシス細胞がが認められ、虚血心筋においても心筋障害に免疫応答細胞によるアポトーシスが関与している可能性が示唆された。

Research Products

• [Publications] Furukawa Y,et al.: "Angiotensin II receptor antagonist TCV‐116 reduces graft coronary artery disease and preserves graft statusin a murine model" Circulation. 93. 333‐339 (1996)
• [Publications] Sasayama S,et al.: "Role of cytokines in the syndrome of heart failure" Int Med. 35. 60‐63 (1996)
• [Publications] Matsumori A,et al.: "Increased circulating hepatocyte growth factor in the early stage of acute myocardial infarction" Biochem Biophys Res Commun. 221. 391‐395 (1996)
• [Publications] Furukawa Y,et al.: "Immunomodulation by an adenylate cyclase activator,NKH477,in vivo and in vitro" Clin Immunol Immunopathol. 79. 25‐35 (1996)
• [Publications] Hasegawa K,et al.: "Endothelin‐1 and its receptor in hypertrophic cardiomyopathy" Hypertension. 27. 259‐264 (1996)
• [Publications] Matsumori A,et al.: "Detection of hepatitis C virus RNA from the heart of patients with hypertrophic cardiomyopathy" Biochem Biophys Res Commun. 222. 678‐682 (1996)
• [Publications] Matsumori A.: "Cytokines in myocarditis and cardiomyopathies" Curr Op in Cardiol. 11. 302‐309 (1996)
• [Publications] Matsumori A,et al.: "Antimyosin antibody imaging in clinical myocarditis and cardiomyopathy : principle and application" Int J Cardiol. 54. 183‐190 (1996)
• [Publications] Matsumori A,et al.: "Intropic agents differentially inhibit the induction of nitric oxide synthase by endotoxin in cultured macrophages" Life Sci. 59. PL121‐PL125 (1996)
• [Publications] Li L‐X,et al.: "Comparative study of ^<201>TI‐scitigraphic image and myocardial patholigic findings in patients with dilated cardiomyopathy" Nucl Med. 10. 307‐314 (1996)
• [Publications] Matsumori A,et al.: "Differential modulation of cytokine production by drugs : Implication for therapy in heart failure" J Mol Cell Cardiol. 28. 2491‐2499 (1996)
• [Publications] Sasayama S,et al.: "Vesnarinone : A Potential Cytokine Inhibitor" J Cardiac Failure. 2. 251‐258 (1996)
• [Publications] Shioi T,et al.: "Persistent expression of cytokine in the chronic stage of viral myocarditis in mice" Circulation. 94. 2930‐2937 (1996)
• [Publications] Matsumori A,et al.: "Newer aspects of pathogenesis of heart failure : Hepatitis C virus infection in myocarditis and cardiomyopathy" J Cardiac Failure. 2 (Suppl). S187‐S194 (1996)
• [Publications] Sasayama S,et al.: "Immunomodulation : A new horizon for medical treatment of heart failure" J Cardiac Failure. 2 (Suppl). S287‐S294 (1996)
• [Publications] Tadamura E,et al.: "Myocardial metabolic changes in hypertrophic cardiomyopathy" J Nucl Med. 37. 572‐577 (1996)
• [Publications] Wang W‐Z,et al.: "Benefical effects of amlodipine in a murine model of congestive heart failure induced by viral myocarditis : A possible mechanism through inhibition of nitric oxide production" Circulation. 95. 245‐251 (1997)