チロシンリン酸化酵素関連分子の遺伝子ターゲティング法によるがん化分子機構の解析

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08265259
• Research Institution: Okazaki National Research Institutes
• Principal Investigator: 八木 健 岡崎国立共同研究機構, 生理学研究所, 助手 (10241241)
• Keywords: チロシンリン酸化酵素 / Fyn / ジーンターゲティング / RNA結合タンパク質 / Src

Research Abstract

チロシンリン酸化活性は細胞の増殖、分化に重要な情報伝達系であり、細胞のがん化との関連性も示唆されている。本研究ではチロシンリン酸化酵素のFynが実際に細胞のがん化の過程でどの様に機能しているかを解析する目的で、Fyn結合分子の単離・解析を行った。その結果、再現性よく強いlacZ遺伝子転写活性を示すクローンを5種類選別した。この5種類の遺伝子配列を決定したところ、Srcファミリーと結合することが報告されているhnRNPが得られており、我々の用いた酵母タンパク質相互作用検出系が実際に機能していることが明らかとなった。また、DNA結合タンパク質のヒトSON遺伝子と相同なクローン、マウスt-complexの不妊染色体領域に位置するtctex-1遺伝子が得られた。他の2種類(TH34,TH82)の遺伝子は現在報告されていない遺伝子であった。ノーザンブロット法によるmRNAのマウス組織分布を調べたところ、TH34は脳で発現が強いが他の組織についても弱い発現が認められるものであった。また、TH82は脳で比較的強い発現が認められるものの、心臓、筋肉においても発現が認められた。得られたTH82の全塩基配列を決定した結果、線虫で得られているfox-1遺伝子と最も相同性が高く、RNA結合タンパク質のファミリーに属する新たな分子であることが明らかとなった。本研究により、チロシンリン酸化酵素のFynの細胞内シグナル伝達分子として新たなRNA結合タンパク質TH82が単離された。チロシンリン酸化酵素の下流シグナル伝達分子としてのRNA結合タンパク質は、現在までのリン酸化シグナルカスケードとは異なったシグナルがRNAに直接作用する可能性を示唆するものとして興味深い。

Research Products

• [Publications] Miyakawa,T.,Yagi,T.,Kagiyama,A. and Niki,H.: "Radial maze performance,open-field and elevated plus-maze behaviors in Fyn-kinase deficient mice ; Further evidence for increased fearfulness" Molecular Brain Research. 37. 145-150 (1996)
• [Publications] Miyakawa,T.,Yagi,T.,Tateishi,K.and Niki,H.: "Susceptibility to drug-induced seizures of Fyn tyrosine kinase-deficient mice" Neuroreport. 7. 2723-2726 (1996)
• [Publications] Kutsuwada,T.,et al: "Impairment of suckling response,trigeminal neuronal pattern formation,and hippocampal LTD in NMDA receptor ε2 subunit mutant mice." Neuron. 16. 333-344 (1996)
• [Publications] Tezuka,T.,et al: "Physical and functional association of the cbl protooncogene product with an Src-family protein tyrosine kinase,p53/56lyn,in the B cell antigen receptor-mediated signaling." Journal of Experimental Medicine. 183. 675-680 (1996)
• [Publications] Yasunaga M.,et al: "Involvement of Fyn tyrosine kinase in progression of cytokinesis of B lymphocyte progenitor." Journal of Cell Biology. 132. 91-99 (1996)
• [Publications] Asada,H.,et al: "Mice lacking the 65 kDa isoform of glutamic acid decarboxylase (GAD65) maintain normal levels of GAD67 and GABA in their brains but are susceptible to seizures" Biochemical and Biophysical Research Communications. 229. 891-895 (1996)
• [Publications] Kai,N.,et al: "Molecular cloning of Fyn-associated molecules in the mouse central nervous system" Journal of Neuroscience Research. (in press). (1997)
• [Publications] 三宝誠、谷口雅彦、八木健: "Cre-loxPを用いた新しい遺伝子変換マウス作製法" 組織培養. 22. 506-511 (1996)
• [Publications] 八木,健等: "遺伝子導入動物の作製とその応用" 新生物化学実験のてびき. 4. 89-134 (1996)