1996 Fiscal Year Annual Research Report

テトラサイクリン/H^+アンチポーターのプロトン輸送機構とイオンチャンネル機能

Research Project

Project/Area Number	08268207
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	山口明人大阪大学, 産業化学研究所, 教授 (60114336)
Keywords	テトラサイクリン排出蛋白 / イオンチャネル / K^+ / アンチポーター / 薬剤排出蛋白
Research Abstract	本年度においては、K^+イオンチャネルとなることのできるテトラサイクリン排出蛋白Tet(K)と、K^+を輸送しないテトラサイクリン排出蛋白Tet(B)の膜内構造の比較研究を行った。Tet(B)は、部位特異的に導入したCys残基へのSH試薬の結合性をもとに詳細な膜トポロジーを決定した。Tet(K)はCys残基を多数含み、Cys導入化学修飾法は使えなかったので、PhoA蛋白融合法で構造決定した。その結果、Tet(B)は広く二次性能動輸送体に保存されている基本構造である12回膜貫通型であったのに対し、Tet(K)は14回膜貫通型であることが立証された。Tet(K)とTet(B)では、前者はK^+を輸送するが後者は輸送しないという以外には、本来のテトラサイクリン輸送体としての生化学的性質にはほとんど差異がない。それにもかかわらず、このように明確な異形が同じテトラサイクリン排出蛋白の中でどうして可能なのか興味が持たれる。2本多い貫通領域がどれに相当するのか、また、このこととTet(K)のK^+輸送能との間になんらかの関連があるのかどうか今後検討していきたい。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] T.Kimura: "Asp-285 of the Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter of Escherichia is Essential for Substrate Binding" FEBS Letters. 388. 50-52 (1996)
[Publications] E.Fujihira: "Transmembrane Glutamic Acid Residues Play Essential Roles in the Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter of Staphylococcus aureus" FEBS Letters. 391. 243-246 (1996)
[Publications] A.Yamaguchi: "His 257 Is a Uniquely Important Histidine Residue for Tetracycline/H^+ Antiport Function but Not Mandatory for Full Activity of the Transposon Tn10-Encoded Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter" Biochemistry. 35. 4359-4364 (1996)
[Publications] Y.Someya: "Mercaptide Formed between the Residue Cys 70 and Hg^<2+> or Co^<2+> Behaves as a Functional Positively Charged Side Chain Operative in the Arg70->Cys Mutant of the Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter" Biochemistry. 35. 9385-9391 (1996)
[Publications] T.Kimura: "Determination of a Transmembrane Segment Using Cysgteine-Scanning Mutants of Transposon Tn10-Encoded Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter" Biochemistry. 35. 15896-15899 (1996)
[Publications] T.Kimura: "Membrane topology of the Transposon 10-Encoded Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter as Studied by Site-Directed Chemical Labeling" The Journal of Biological Chemistry. 272. 580-585 (1997)
[Publications] 山口明人: "細菌薬剤排出蛋白の分子機構" バイオサイエンスとインダストリー. 54. 19-23 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

テトラサイクリン/H^+アンチポーターのプロトン輸送機構とイオンチャンネル機能

Principal Investigator

山口 明人 大阪大学, 産業化学研究所, 教授 (60114336)

Research Products

[Publications] T.Kimura: "Asp-285 of the Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter of Escherichia is Essential for Substrate Binding" FEBS Letters. 388. 50-52 (1996)

[Publications] E.Fujihira: "Transmembrane Glutamic Acid Residues Play Essential Roles in the Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter of Staphylococcus aureus" FEBS Letters. 391. 243-246 (1996)

[Publications] A.Yamaguchi: "His 257 Is a Uniquely Important Histidine Residue for Tetracycline/H^+ Antiport Function but Not Mandatory for Full Activity of the Transposon Tn10-Encoded Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter" Biochemistry. 35. 4359-4364 (1996)

[Publications] Y.Someya: "Mercaptide Formed between the Residue Cys 70 and Hg^<2+> or Co^<2+> Behaves as a Functional Positively Charged Side Chain Operative in the Arg70->Cys Mutant of the Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter" Biochemistry. 35. 9385-9391 (1996)

[Publications] T.Kimura: "Determination of a Transmembrane Segment Using Cysgteine-Scanning Mutants of Transposon Tn10-Encoded Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter" Biochemistry. 35. 15896-15899 (1996)

[Publications] T.Kimura: "Membrane topology of the Transposon 10-Encoded Metal-Tetracycline/H^+ Antiporter as Studied by Site-Directed Chemical Labeling" The Journal of Biological Chemistry. 272. 580-585 (1997)

[Publications] 山口 明人: "細菌薬剤排出蛋白の分子機構" バイオサイエンスとインダストリー. 54. 19-23 (1996)

山口明人大阪大学, 産業化学研究所, 教授 (60114336)

[Publications] 山口明人: "細菌薬剤排出蛋白の分子機構" バイオサイエンスとインダストリー. 54. 19-23 (1996)