1998 Fiscal Year Annual Research Report

薬剤の標的となる分子の探索と新規化学療法剤の開発

Research Project

Project/Area Number	08281105
Research Institution	Okayama University
Principal Investigator	綿矢有佑岡山大学, 薬学部, 教授 (90127598)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	関水和久九州大学, 薬学部, 教授 (90126095) 木村政継大阪市立大学, 医学部, 助手 (60195378) 北潔東京大学, 医学研究科, 教授 (90134444) 板井昭子北里研究所, 部長研究員 (60012647) 松田彰北海道大学, 薬学研究科, 教授 (90157313)
Keywords	マラリア / 抗マラリア薬 / マラリア治療薬 / 標的分子 / スクリーニンヅ / 原虫 / 熱帯熱マラリア / ミトコンドリア
Research Abstract	計画研究第二班は、薬剤耐性マラリアを克服できる新しいマラリア治療薬の開発を行い、マラリア制圧に寄与することを研究目的としている。以下に平成10年度の研究実績を概説する。 1) 抗マラリア作用を持つ化合物の検索:マラリア原虫の新しい培養系の確立と薬効スクリーニングの実施を行った。本特定領域研究班員、及び国公立、並びに民間の研究機関(60研究グループ)より抗マラリア作用検定の依頼のあった化合物(平成11年2月までに3891検体の評価を終えた)の薬効判定を行った。その結果、64検体に100倍以上の選択毒性を示す抗マラリア作用を認めた。特記すべきことは新規物質3-tert-butyl-7,8,12,13-tetraoxapiro[5,7]tridecaneに選択毒性10、000を有する優れた抗マラリア作用(IC_<50>=3.2x10^9M)を見出した。この化合物は次世代の抗マラリア剤と成りうる可能性がある。 2) 熱帯熱マラリア原虫の特異な膜能動輸送タンパク(PfATP3)がトロホゾイト期にも発現していることを明らかにし、鶏とマラリア原虫のキメラCa2+-ATPase遺伝子発現システムの構築した。 3) 抗マラリア原虫薬の標的分子の検索を目的として、液胞型ATPaseと食胞機能関連蛋白を分子生物学及び細胞生物学の手法で解析した。 4) マラリア原虫ミトコンドリアのkey enzymeである複合体II(コハク酸脱水素酵素:SDH)の触媒部位を構成するFpおよびIpの両サブユニットの遺伝子を一つのプラスミドに挿入し、大腸菌で組み換え酵素の発現させた。 5) ヌクレアーゼに対する抵抗性を示す4'αアミノエチルチミジンを含むホスホジエステル型アンチセンスオリゴヌクレオチドを合成した。 6) ダフィー抗原およびグリコフォリンAの遺伝子を、マウス129系統のゲノムライブラリーからクローニングし、ターゲテイングベクターを構築した。 7) プテリジン誘導体は、P.f.シクログアニル耐性株型DHFRのIC_<50>が48nMで、P.f.FCR3株とヒトKB細胞の増殖阻害のEC_<50>はそれぞれ10nM、8800nMで選択毒性も高く、ネズミでは10mg/kg.dayでP.bergeiの増殖を78%阻害した。

Research Products

(16 results)

All Other

All Publications (16 results)

[Publications] H-S.Kim: "Cycloprodigiosin hydrochloride obtained from Pseudoalteromonas denitrificans is a potent antimalarial agent" Biol.Pharm.Bull.(印刷中).
[Publications] M.U.Ferreira: "Stable patterns of allelic diversity at the merozoite surface protein-1 locus of Plasmodium falciparum in clinical isolates from Southern Vietnam." J.Eukaryotic Microbiol. 45. 131-136 (1998)
[Publications] M.Zhou: "High prevalence of Plasmodium malariae and P.ovale in malaria patients along the Thai-Mvanmar Border.as revealed by acridine orange staining and PCR-based diagnoses." Trop.Med. & Int.Health. 11. 304-312 (1998)
[Publications] M.U.Ferreira: "Allelic diversity at the merozoite surface protein-1 locus of Plasmodium falciparum in clinical isolates from southwestern Brazilian Amazon." Am.J.Trop.Med.Hyg.59. 474-480 (1998)
[Publications] Q.Liu: "Sequence variation in the small-subunit rRNA gene of Plasmodium malariae and prevalence of isolates with the variant sequence in Sichuan, China." J.Clinical Microbiol.36. 3378-3381 (1998)
[Publications] K.Iwasa: "Antimalarial activity and structure-relationships of protoberberine alkaloids." Eur.J.Med.Chem.33. 65-69 (1998)
[Publications] H.-S.Kim: "A potent animalarial activity of5-fluoroorotate in combination with sulfamonomethoxine against Plasmoduium falciparum in vitroand Plasmodium berghei in mice." Parasitol.Int.47. 59-67 (1998)
[Publications] M.Takahara: "Antimalarial Activity and Nucleoside Transport Inhibitory Activity of the Triterpenic Constituents of Cim icifuga spp" Biochem.Pharm.Bull.21. 823-828 (1998)
[Publications] M.Nakamura: "Deoxyribonucleoside Triphosphates in Mouse Fetal Liver Cells Assayed by High Pressure Liquid Chromatograpy." Toxicology Methods. 8. 11-16 (1998)
[Publications] Y.Takaya: "Novel antimalarial guaiane-type sesquiterpenoids from Nardostachys chinensis roots." Tetrahedron Lett.39. 1361-1364 (1998)
[Publications] N.Murakami: "Anti-malarial activities of acylated bruceolide derivatives." Bioorg.Med.Chem.Letters.8. 459-461 (1998)
[Publications] J.Miyata: "Antimararial activities in vitro of homoprotoberberine derivatives.Desigen of novel antimaralials and structure-activity relationship analysis." Helerocycles. 49. 101-104 (1998)
[Publications] H.Miyaoka: "Antimalarial activity of kalihinol A and new relative diterpenoids from the okinawan sponge, Acanthella sp." Tetrahedron. 54. 13467-13474 (1998)
[Publications] Y.Ueno: "Synthesis of oligodexynucleosides containing 4'a-C-aminoalkylthymidines and their thermal stability and nuclease-resistance properties." Nucleic Acids Symposium Series. 39. 13-14 (1998)
[Publications] Y.Wataya: "Usefulness of a new DNA diagnostic method for malaria ; microfiter plate-hybridization" Tokai J.Exp.Clin.Med.23. 87-88 (1998)
[Publications] A.Meiji: "Malaria research in Solomon Island" Inter Croup Corporation (Tokyo), 192 (1998)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

薬剤の標的となる分子の探索と新規化学療法剤の開発

Principal Investigator

綿矢 有佑 岡山大学, 薬学部, 教授 (90127598)

Research Products

[Publications] H-S.Kim: "Cycloprodigiosin hydrochloride obtained from Pseudoalteromonas denitrificans is a potent antimalarial agent" Biol.Pharm.Bull.(印刷中).

[Publications] M.U.Ferreira: "Stable patterns of allelic diversity at the merozoite surface protein-1 locus of Plasmodium falciparum in clinical isolates from Southern Vietnam." J.Eukaryotic Microbiol. 45. 131-136 (1998)

[Publications] M.Zhou: "High prevalence of Plasmodium malariae and P.ovale in malaria patients along the Thai-Mvanmar Border.as revealed by acridine orange staining and PCR-based diagnoses." Trop.Med. & Int.Health. 11. 304-312 (1998)

[Publications] M.U.Ferreira: "Allelic diversity at the merozoite surface protein-1 locus of Plasmodium falciparum in clinical isolates from southwestern Brazilian Amazon." Am.J.Trop.Med.Hyg.59. 474-480 (1998)

[Publications] Q.Liu: "Sequence variation in the small-subunit rRNA gene of Plasmodium malariae and prevalence of isolates with the variant sequence in Sichuan, China." J.Clinical Microbiol.36. 3378-3381 (1998)

[Publications] K.Iwasa: "Antimalarial activity and structure-relationships of protoberberine alkaloids." Eur.J.Med.Chem.33. 65-69 (1998)

[Publications] H.-S.Kim: "A potent animalarial activity of5-fluoroorotate in combination with sulfamonomethoxine against Plasmoduium falciparum in vitroand Plasmodium berghei in mice." Parasitol.Int.47. 59-67 (1998)

[Publications] M.Takahara: "Antimalarial Activity and Nucleoside Transport Inhibitory Activity of the Triterpenic Constituents of Cim icifuga spp" Biochem.Pharm.Bull.21. 823-828 (1998)

[Publications] M.Nakamura: "Deoxyribonucleoside Triphosphates in Mouse Fetal Liver Cells Assayed by High Pressure Liquid Chromatograpy." Toxicology Methods. 8. 11-16 (1998)

[Publications] Y.Takaya: "Novel antimalarial guaiane-type sesquiterpenoids from Nardostachys chinensis roots." Tetrahedron Lett.39. 1361-1364 (1998)

[Publications] N.Murakami: "Anti-malarial activities of acylated bruceolide derivatives." Bioorg.Med.Chem.Letters.8. 459-461 (1998)

[Publications] J.Miyata: "Antimararial activities in vitro of homoprotoberberine derivatives.Desigen of novel antimaralials and structure-activity relationship analysis." Helerocycles. 49. 101-104 (1998)

[Publications] H.Miyaoka: "Antimalarial activity of kalihinol A and new relative diterpenoids from the okinawan sponge, Acanthella sp." Tetrahedron. 54. 13467-13474 (1998)

[Publications] Y.Ueno: "Synthesis of oligodexynucleosides containing 4'a-C-aminoalkylthymidines and their thermal stability and nuclease-resistance properties." Nucleic Acids Symposium Series. 39. 13-14 (1998)

[Publications] Y.Wataya: "Usefulness of a new DNA diagnostic method for malaria ; microfiter plate-hybridization" Tokai J.Exp.Clin.Med.23. 87-88 (1998)

[Publications] A.Meiji: "Malaria research in Solomon Island" Inter Croup Corporation (Tokyo), 192 (1998)

綿矢有佑岡山大学, 薬学部, 教授 (90127598)