1997 Fiscal Year Annual Research Report

脂肪酸β酸化異常症の早期診断と病因検索体制の確立

Research Project

Project/Area Number	08307008
Research Institution	Shimane Medical University
Principal Investigator	山口清次島根医科大学, 医学部, 教授 (60144044)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木康之岐阜大学, 医学部, 助教授 (00163014) 澤田淳京都府立医科大学, 医学部, 教授 (10079874) 橋本隆信州大学, 医学部, 教授 (80009935)
Keywords	脂肪酸β酸化異常症 / ペルオキシソーム病 / スクリーニング / 質量分析 / 酵素診断 / 遺伝子解析 / アシルカルニチン
Research Abstract	(a)山口は、わが国におけるミトコンドリアβ-酸化異常症患者の実態調査を行い、1985年以降40症例を見い出し検討した.また簡便なスクリーニング法として安定同位体希釈法によるアシルグリシン分析の分析系を確立した.さらにケトン体代謝異常症の診断のために、これまで診断の難しかった細胞質型チオラーゼ欠損症の末梢リンパ球を用いる診断法を確立した. (b)橋本は,ミトコンドリアとペルオキシソームの脂肪酸β-酸化系諸酵素の解析法を検討した.殆ど全ての酵素は培養皮膚線維芽細胞で検索できること、酵素蛋白質の存在はラット酵素に対する抗体を用いたイムノブロット法で確認できること、いくつかの酵素活性は比色法によって行えることが確認された.なおペルオキシソーム系の新しい酵素(D型二頭酵素)の存在を明らかにした. (c)沢田は、脂肪酸β-酸化障害が疑われる症例に対するタンデムマスによるカルニチン分析を引き続き検討した.新たに原発性全身性カルニチン欠乏症と思われる症例を診断した.また酵素診断されたVLCAD欠損症2例のカルニチン分析を行い本法の有用性を確認した.二次スクリーニングとして重水素標識脂肪酸を培養メディウムに加えて白血球中のアシルカルニチン分析による診断系を検討して有用性を確認した. (d)鈴木は、わが国におけるペルオキシソーム病の実態調査をまとめた.また血液ろ紙を用いた極長鎖脂肪酸分析法を確立した.さらに昨年報告した2例のD型二頭酵素欠損症の分子病態を解析した.D型二頭酵素の活性、蛋白質ともに欠損していた.遺伝子解析の結果、1例は52塩基、もう1例は237塩基の欠失がcDNA上に検出され、D型二頭酵素欠損症であることを確定した.従来、二頭酵素欠損症はすべてL型酵素異常と考えられてきたが、ペルオキシソームβ-酸化系に新しい知見を加えた.

Research Products

(21 results)

All Other

All Publications (21 results)

[Publications] Fukao T: "Identification of three novel frameshift mutations(83delAT,754insCT,and 435+1G to A)of mitochondrial acetoacetyl-coenzyme A thiolase gene in two Swiss patients with CRM-negative β-ketothiolase deficiency." Human Mutation. 9. 277-279 (1997)
[Publications] Orii K: "Genomic and mutational analysis of the mitochondrial trifunctional protein β-subunit(HADHB)gene in patients with trifunctional protein deficiency." Hum Mol Genet. 6. 1215-1224 (1997)
[Publications] Fukao T: "Enzymes of ketone body utilization in human tissues : perotein and messenger RNA levels of succinyl-cpenzyme A(CoA) : 3-ketoacid CoA transferase and mitochondrial cytosolivc acetoacetyl-CoA thiolases." Ped Res. 42. 498-502 (1997)
[Publications] Murayama K: "Isolated 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase deficiency in a 15-year-old girl." Brain & Dev. 19. 303-305 (1997)
[Publications] Jiang LL: "Structure of D-3-hydrozyacyl-CoA dehydrogenase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenese bifunctional protein." J Biochem. 121. 364-369 (1997)
[Publications] Jiang LL: "Physiological role of D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase bifunctional protein." J Biochem. 121. 506-513 (1997)
[Publications] Miyajima H: "Mitochondrial trifunctional protein deficiency associated whth recurrent myoglobinuria in adolecence." Neurology. 49. 833-837 (1997)
[Publications] Orii KO: "Molecular characterization of the mouse very-long-chain acyl-CoA dehydrogenase gene." Mammalian Genome. 8. 516-518 (1997)
[Publications] Nakajima T: "The effect of carnitine on ketogenesis in perfused livers from Juvenil visceral steatosis mice with systemic carnitine deficiency." Pediatr Res. 42. 108-113 (1997)
[Publications] Suzuki Y: "D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase bifunctional protein deficiency : A newly identified peroxisomal disorder." Am J Hunan Genet. 61. 1153-1162 (1997)
[Publications] Suzuki Y: "Use of buccal smears for rapid detection of peroxisomes." Eur J Pediatr. 156. 250 (1997)
[Publications] Inoue K: "Very long chain fatty acid analysis of dried blood spots on filter paper to screen for adrenoleukodystrophy." Clin Chem. 43. 2197-2198 (1997)
[Publications] Shimozawa N: "A novel mutation in peroxisome assembly factor-1 responsible for Zellweger syndrome." Human Mutation. 10(Suppl1). s134-136 (1998)
[Publications] Fukuda S: "Amino acid and nucleotide sequences of human peroxisomal enoyl-CoA hydratase : 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase cDNA" J Inher Metab Dis. 21. 23-28 (1998)
[Publications] 井上文夫: "エレクトロスプレーマススペクトロメトリーによる濾紙血の分析." 京都教育大学紀要. 91. 15-22 (1997)
[Publications] 鈴木康之: "ペルオキシソーム病の病因と診断法." 小児科. 38. 1373-1379 (1997)
[Publications] 鈴木康之: "ペルオキシゾーム病の成因と治療に関する研究." 日本先天代謝異常学会雑誌. 13. 209-214 (1997)
[Publications] 山口清次: "GC/MSによるマススクリーニング法の検討:ウレアーゼ処理直接乾固法と溶媒抽出法の比較." 臨床検査. 42. 357-363 (1998)
[Publications] 山口清次(白木和夫, 前川喜平編): "小児科学-有機酸代謝異常症-" 医学書院,東京, 268-275 (1997)
[Publications] 鈴木康之(白木和夫, 前川喜平編): "小児科学-ベルオキシソームでの代謝異常-" 医学書院,東京, 291-297 (1997)
[Publications] 山口清次(赤沼安夫他編): "医学のあゆみ(別冊)内分泌・代謝疾患-有機酸代謝異常症へのアプローチ-" 医歯薬出版,東京, 551-553 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

脂肪酸β酸化異常症の早期診断と病因検索体制の確立

Principal Investigator

山口 清次 島根医科大学, 医学部, 教授 (60144044)

Research Products

[Publications] Fukao T: "Identification of three novel frameshift mutations(83delAT,754insCT,and 435+1G to A)of mitochondrial acetoacetyl-coenzyme A thiolase gene in two Swiss patients with CRM-negative β-ketothiolase deficiency." Human Mutation. 9. 277-279 (1997)

[Publications] Orii K: "Genomic and mutational analysis of the mitochondrial trifunctional protein β-subunit(HADHB)gene in patients with trifunctional protein deficiency." Hum Mol Genet. 6. 1215-1224 (1997)

[Publications] Fukao T: "Enzymes of ketone body utilization in human tissues : perotein and messenger RNA levels of succinyl-cpenzyme A(CoA) : 3-ketoacid CoA transferase and mitochondrial cytosolivc acetoacetyl-CoA thiolases." Ped Res. 42. 498-502 (1997)

[Publications] Murayama K: "Isolated 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase deficiency in a 15-year-old girl." Brain & Dev. 19. 303-305 (1997)

[Publications] Jiang LL: "Structure of D-3-hydrozyacyl-CoA dehydrogenase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenese bifunctional protein." J Biochem. 121. 364-369 (1997)

[Publications] Jiang LL: "Physiological role of D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase bifunctional protein." J Biochem. 121. 506-513 (1997)

[Publications] Miyajima H: "Mitochondrial trifunctional protein deficiency associated whth recurrent myoglobinuria in adolecence." Neurology. 49. 833-837 (1997)

[Publications] Orii KO: "Molecular characterization of the mouse very-long-chain acyl-CoA dehydrogenase gene." Mammalian Genome. 8. 516-518 (1997)

[Publications] Nakajima T: "The effect of carnitine on ketogenesis in perfused livers from Juvenil visceral steatosis mice with systemic carnitine deficiency." Pediatr Res. 42. 108-113 (1997)

[Publications] Suzuki Y: "D-3-hydroxyacyl-CoA dehydratase/D-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase bifunctional protein deficiency : A newly identified peroxisomal disorder." Am J Hunan Genet. 61. 1153-1162 (1997)

[Publications] Suzuki Y: "Use of buccal smears for rapid detection of peroxisomes." Eur J Pediatr. 156. 250 (1997)

[Publications] Inoue K: "Very long chain fatty acid analysis of dried blood spots on filter paper to screen for adrenoleukodystrophy." Clin Chem. 43. 2197-2198 (1997)

[Publications] Shimozawa N: "A novel mutation in peroxisome assembly factor-1 responsible for Zellweger syndrome." Human Mutation. 10(Suppl1). s134-136 (1998)

[Publications] Fukuda S: "Amino acid and nucleotide sequences of human peroxisomal enoyl-CoA hydratase : 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase cDNA" J Inher Metab Dis. 21. 23-28 (1998)

[Publications] 井上文夫: "エレクトロスプレーマススペクトロメトリーによる濾紙血の分析." 京都教育大学紀要. 91. 15-22 (1997)

[Publications] 鈴木康之: "ペルオキシソーム病の病因と診断法." 小児科. 38. 1373-1379 (1997)

[Publications] 鈴木康之: "ペルオキシゾーム病の成因と治療に関する研究." 日本先天代謝異常学会雑誌. 13. 209-214 (1997)

[Publications] 山口清次: "GC/MSによるマススクリーニング法の検討:ウレアーゼ処理直接乾固法と溶媒抽出法の比較." 臨床検査. 42. 357-363 (1998)

[Publications] 山口清次(白木和夫, 前川喜平編): "小児科学-有機酸代謝異常症-" 医学書院,東京, 268-275 (1997)

[Publications] 鈴木康之(白木和夫, 前川喜平編): "小児科学-ベルオキシソームでの代謝異常-" 医学書院,東京, 291-297 (1997)

[Publications] 山口清次(赤沼安夫他編): "医学のあゆみ(別冊)内分泌・代謝疾患-有機酸代謝異常症へのアプローチ-" 医歯薬出版,東京, 551-553 (1997)

山口清次島根医科大学, 医学部, 教授 (60144044)