1997 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
08407015
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Research Institution | Gunma University School of Medicine |
Principal Investigator |
岸 紘一郎 群馬大学, 医学部, 教授 (30169841)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
細見 修 群馬大学, 医学部, 助手 (30134274)
中島 たみ子 群馬大学, 医学部, 助手 (40008561)
竹下 治男 群馬大学, 医学部, 講師 (90292599)
安田 年博 群馬大学, 医学部, 助教授 (80175645)
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Keywords | 個人識別 / 遺伝的多型 / デオキリシボ核酸分解酵素 / cDNA / DNA多型 / STR |
Research Abstract |
我々はヒトDNaseIが遺伝的形質であることを発見した。法医鑑識科学や親子鑑定などの法医実務にDNaseI型を利用して多大な成果をあげることができ、DNaseI型がこの分野に利用できる極めて優秀な遺伝マーカーのひとつであることを証明した。従前の研究から、DNaseI多型について4対立遺伝子が同定されていたが、今回5番目の対立遺伝子(アリル)を発見した。アリル5はアリル2の1227ヌクレオチドにおけるG→A置換に基づくものであった。これに関連して、従来のDNaseI型判定法に使用したIEF-PAGE法に改良を加え、再現性良くすべての表現型を分離できるシステムを開発した。その結果、DNaseI型は15種類の表現型に分類でき、個人識別能の向上がもたらされた。さらに、日本人集団以外の民族集団にもDNaseI多型の存在が確認され、DNaseI多型は"world-wide"なものであることが明らかとなった。また、汗および汗付着靴下に関するDNaseI型の法医学的応用の結果から、微量な体液班からの個人識別マーカーとしてのDNaseI型の優秀性が再評価された。従って、DNaseI型は轢き逃げ車両に付着した微量な組織片から容疑者を特定する際に、極めて個人識別能に優れた遺伝マーカーであることが判明した。我々は、DNaseIIについてもその遺伝的多型の存在を報告しているが、本研究ではその完全長cDNA構造を解明した。これは脊椎動物DNaseIIについて初めて報告されたcDNA構造であった。さらに、轢き逃げ車両に付着した微量な組織片からの個人識別検査にDNA多型を導入するための基礎的知見として、2種類のSTRマーカー(HumTPOとHumLPL)について集団遺伝学的調査を実施したところ、個人識別において両STRマーカーの同時型判定が有効であることも明らかにした。
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[Publications] Yasuda,T.: "Purification of deoxyribonuclease I(DNase I)using two-step chromatography" Analytical Biochemistry. 245(2). 255-257 (1997)
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[Publications] Aoyama,M.: "DYS19 marker in Japanese populations" International Journal of Legal Medicine. 110(2). 112-113 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Populations studies of human deoxyribonuclease I polymorphism" Human Heredity. 47(3). 121-124 (1997)
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[Publications] Takeshita,H.: "Mouse deoxyribonuclease I(DNase I)" Biochemistry and Molecular Biology International. 42(1). 65-75 (1997)
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[Publications] Iida,R.: "The fifth allele of the human deoxyribonuclease I(DNase I)polymorphism" Electrophoresis. 18(11). 1936-1939 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Rabbit deoxyribonuclease I(DNase I)" Biochemical Journal. 325(2). 465-473 (1997)
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[Publications] Takeshita,H.: "The STR loci HumTPO and HumLPL:population genetic data in eight populations" International Journal of Legal Medicine. 110(6). 331-333 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Activity measurement for deoxyribobnucleases I and II with picogram sensitivity based on DNA/SYBR Green I fluorescence" Analytical Biochemistry. 255(2). 274-276 (1998)
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[Publications] Hosomi,O.: "Simple porification method of the antiphospholipid antibody from normal human plasma" Experimental and Clinical Immunogenetics. 14(4). 281-285 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Genetic polymorphisms detected in human urine:their application to forensic individualization" The Japanese Journal of Legal Medicine. 51(6). 407-416 (1997)
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[Publications] Yasuda,T.: "Molecular cloning of the cDNA encoding human deoxyribonuclease II" The Journal of Biological Chemistry. 273(5). 2610-2616 (1998)
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[Publications] Tsutsumi,S.: "Phenotype 2 of deoxyribonuclease I may be used as a risk factor of gastric cancer" Cancer. (in press).
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[Publications] Takeshita,H.: "Detection of the two short tandem repeat loci(HumTPO and HumLPL)in Japanese populations using discontinuous polyacrylamide gel electrophoresis" The Japanese Journal of Legal Medicine. (in press).
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[Publications] Nakajima,T.: "Two novel screening methods for selecting monoclonal antibodies which specifically inhibit DNase I enzyme activity" Immunological Investigations. (in press).
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[Publications] Yasuda,T.: "Chromosomal localization of a human deoxyribonuclease II gene(DNASE2)to 19p13.2-p13.1 using both the polymerase chain reaction and fluorescence in situ hybridization analysis" Biochemical and Biophysical Research communications. (in press).
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[Publications] Yasuda,T.: "Anthropological application of genetic polymorphisms detected in human urine:a review of Japanese studies" Rivista di Antropologia. (in press).
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[Publications] 灘野大太: "アポトーシスとエンドヌクレアーゼとの関連性" 臨床薬理の進歩. No.18. 105-110 (1997)
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[Publications] 岸紘一郎: "核酸分解酵素DNase Iの遺伝的多型の発見" 医学のあゆみ. 180(10). 658-659 (1997)
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[Publications] 灘野大太: "ヒトのDNaseIおよびIIとアポトーシスとの関連性:ヒトDNaseI遺伝子構造とpolymorphic siteの同定" 総合健康推進財団 研究報告書(第11)平成6年度助成事業. 111-119 (1997)
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[Publications] 安田年博: "核酸分解酵素の遺伝的多型を利用した膵肝疾患罹患のハイリスクグループ特定に関する予防医学的研究" 膵臓病研究財団第3回研究報告書. No.3. 1-4 (1997)
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[Publications] 飯田礼子: "PCR-SSCP法によってヒトdeoxyribonuclease I遺伝子の第7イントロン内に検出される新しい多型部位" DNA多型. Vol.5. 203-206 (1997)