アンチセンスオリゴヌクレオチド血管内投与による悪性脳腫瘍遺伝子治療の試み

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08407043
• Research Institution: KYUSHU UNIVERSITY
• Principal Investigator: 福井 仁士 九州大学, 医学部, 教授 (10038713)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 稲村 孝紀 九州大学, 医学部, 助手 (50274460) ; 池崎 清信 九州大学, 医学部, 講師 (10145360) ; 西尾 俊嗣 九州大学, 医学部, 講師 (10180580)
• Keywords: bradykinin / brain tumor / antisense oligonucleotide / microsatellite / apoptosis / chemotherapy

Research Abstract

1. 悪性脳腫瘍の遺伝子学的特性の検討:悪性脳腫瘍の遺伝子を抽出して、マイクロサテライト不安定性を検討し、10番染色体上のマイクロサテライト不安定性(DNA修復酵素の異常)が悪性度に関与しているという結果を得た。また、アポトーシスの免疫染色で、悪性脳腫瘍にはアポトーシスが少ないという結果も得られた。このことから、脳腫瘍の悪性化には遺伝子の異常が強く関与していることが伺われた。
2. ラット生体内に投与した、臓器内アンチセンスオリゴヌクレオチドの定量法の確立:脳および肝臓・腎臓をラットより採取した後、フィルターを用いてDNA分画に生成した後、アクリルアミドゲル上で電気泳動を行い、メンブレン上にプロティングして固定した。このメンブレンに対して、RIで標識したセンスオリゴヌクレオチドを用いて定量した。われわれが確立したこの方法によって、生体内に投与した任意のアンチセンスオリゴヌクレオチドを抽出定量可能となった。
3. ブラディキニン併用投与によるラット悪性脳腫瘍へのアンチセンスオリゴヌクレオチドの到達度増強:前述の手法を用いて、内頚動脈より投与したアンチセンスオリゴヌクレオチドの脳および脳腫瘍内到達度を検討した。ブラデイキニンを併用投与することにより、脳腫瘍組織内へ1.4倍の任意のアンチセンスオリゴヌクレオチド到達率を増強することが可能であった。
4. 犬によるブラディキニン内頚動脈投与の安全性の確認:成犬20頭を用いてブラディキニン内頚動脈投与の安全性を確認した。犬の脳血流、血圧、脈をモニターしながらブラディキニンの内頚動脈投与を4つの異なる濃度で検討した。1r、2.5rではバイタルサインの大きな変化は認めなかったが、5r、10rではブラディキニン投与初期に脳血流の変化を認めた。

Research Products

• [Publications] Inamura T et al: "Experimental trials of brain tumor therapy through blood-brain barrier/blood-tumor barrier." Crit Rev Neurosung. 6. 351-355 (1996)
• [Publications] Kovacs Z et al: "VEGF and flt expression time kinetics in rat brain infarct." Stroke. 27. 1865-1873 (1996)
• [Publications] Koga H et al: "Increased delivery of a new cisplatin analogue (254-S)in a rat brain tumor by an intracarotid infusion of bradykinin." Neurol Res. 18. 244-247 (1996)
• [Publications] Matsukado K et al: "Effect of calcium antagonists on regional cerebral blood flow in transplanted rat brain tumors." J Meuro Onco. 27. 1-10 (1996)
• [Publications] Shono T et al: "Involvement of the transcription factor NF-kb in tubular morphogenesis of human microvascular endothelial cells by oxidative stress." Mol Cell Biol. 16. 4231-4239 (1996)
• [Publications] Matsukado K et al: "Enhanced tumor uptake of Carboplatin and survival in glioma-bearing rats by intaracarotid infusion of bradykinin Analog,RMP-7." Neurosurgery. 39. 125-134 (1996)
• [Publications] Nishio S et al: "Radiation injury of the brain.Crit Rev Neurosurg 7:408-415,1997" Crit Rev Neurosurg. 7. 408-415 (1997)
• [Publications] Kovacs Z et al: "A chronological evalution of experimental brain i nfact by diffusion-mapping and magnetization transfer contrast imaging" Acta Neurochir Suppl.70. 43-45 (1997)
• [Publications] Nishio S et al: "A clinicopathologic analysis of 20 cases with reference to patient age." Acta Neurochir. 139. 336-342 (1997)
• [Publications] Ikezaki K et al: "Specificity of brain tumor capillaries and novel drug delivery system." Annals of Cancer Research and Therapy. 6. 39-44 (1997)
• [Publications] Ikezaki K et al: "Apparent diffusion coefficient (ADC)and magnetization transfer contrast (MTC)mapping of experimental brain tumor." Acta Neurochir Suppl.70. 170-172 (1997)
• [Publications] Kuba H et al: "Thiamine-deficient lactic acidosis with brain tumor treatment Report of three cases." J Neurosurg. 89. 1025-1028 (1998)
• [Publications] Nishio S et al: "Radiation-induced brain tumours:Potential late complications of radiation therapy for brain tumours." Acta Neurochir. 140. 763-770 (1998)
• [Publications] Nishio S et al: "Medulloblastoma in the first year of life:a repor t of five cases." JClin Neuroscience. 5. 265-269 (1998)
• [Publications] Mizoguchi M et al: "A comparative immunohistochemical study of tissue transglutaminase and factor XIIIa in hemangioblastima." Neuropatholgy. 18. 199-205 (1998)
• [Publications] Mizoguchi M et al: "Abnomal cytoarchitecture of cortical dysplasia verified by immunohistochemistry Clin Neuropathol 17:100-109,1998" Clin Neuropathol. 17. 100-109 (1998)
• [Publications] NIshio S et al: "Primitive neuroectodermal tumors. Crit Rev Neurosurg 8:261-268,1998" Crit Rev Neurosurg. 8. 261-268 (1998)