1998 Fiscal Year Annual Research Report
内軟骨性骨形成に関与する制御因子についての分子細胞生物学的研究
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08407058
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| Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
加藤 幸夫 広島大学, 歯学部, 教授 (10112062)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
能城 光秀 広島大学, 歯学部, 助教授 (00144858)
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| Keywords | 軟骨特異的発現 / 軟骨細胞 / トランスフェリン / MTF / PTH |
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| Research Abstract |
私たちは軟骨細胞に特異的に存在して、かつConAと結合する膜蛋白(膜結合型トランスフェリン様蛋白、MTF=コンドロトランスフェリン)を精製してそのcDNAをクローニングした。これについては本年度に公表した(Kawamoto T.et al.Eur.J.Biochem.1998)。さらにこの蛋白のゲノム遺伝子の構造を、promoter域を含めて決定した(中舛ら、基礎歯科医学会1998)。現在、軟骨特異的発現に関与するエンハンサー領域を決定するために、この遺伝子上流2kbをルシフェラーゼと連結したキメラ遺伝子を作成して、研究を進めている。またマウスのコンドロトランスフェリンcDNAをクローニングして、その構造を決定し、MTFの系統進化上におけや位置づけが、他のトランスフェリン遺伝子ファミリーとは明らかに異なることを明らかにした(中舛ら、基礎歯科医学会1998)。
さらにマウスコンドロトランスフェリンをプローベとして、コンドロトランスフェリン遺伝子が他の軟骨特異的遺伝子であるアグリカンおよびII型コラーゲンと平行して発現することを証明した(中舛ら、基礎歯科医学会1998、Nakamasu et al.,論文作成中)。興味深いことに、コンドロトランスフェリンのアンチセンスオリゴマーを軟骨細胞培養系に添加すると、軟骨分化が遅延した(中舛ら、基礎歯料医学会1998)。
さらにPTH-C端ペプチドが、MMP以外に、オステオポンチン、X型コラーゲン、PTHrp、PTH受容体mRNAレベルを上昇または減少させることを見いだして報告した(吉田ら、日本軟骨代謝学会発表1999)。
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[Publications] Makihira,S.,et al.: "Enhancement of cell adhesion by a cartilage-characteristic noncollagenous protein,cartilage matrix protein(CMP),via integrin α1β1." J.Biol.Chem.(in press).
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[Publications] Kawashima-Ohya,Y.,et al.: "Effects of parathyroid hormone(PTH)and PTH-related peptide on expressions of matrix metalloproteinase-2,-3,and-9 in growth plate chondrocyte cultures." Endocrinology. 139. 2120-2127 (1998)
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[Publications] Kawamoto,T.,et al.: "Structual and phylogenetic analyses of RGD-CAP/big-h3,a fasciclin like adhesion protein expressed in chick chondrocytes." Biochimica et Biophysica Acta. 1395. 288-292 (1998)
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[Publications] Nishimura,M.,et al.: "Role of chondroitin sulfate-hyaluronan interactions in the viscoelastic properties of extracellular matrices and fluids." Biochimica et Biophysica Acta. 1380. 1-9 (1998)
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[Publications] Kawamoto,T.,et al.: "Expression of membrane-bound transferrin-like protein p97 on the surface of chondrocytes." Eur.J.Biochem.256. 503-509 (1998)
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[Publications] Shiba,H.,et al.: "Differential effects of various growth factors and cytokines on the syntheses of DNA,typeI collagen,laminin,fibronectin,osteonectin/secreted protein,acidic and rich in cysteine(SPARC),and alkaline phosphatase by human pulp cells in culture." J.Cell Physiol.174. 194-205 (1998)
